ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение биомассы взвешиванием из "Руководство к практическим занятиям по микробиологии Изд.3" Этот метод широко применяют для оценки роста микроорганизмов в жидких питательных средах. Можно использовать его и для определения массы клеток, выращенных на плотной питательной среде, однако в этом случае микроорганизмы необходимо предварительно тщательно смыть с поверхности среды физиологическим раствором или водой и перевести в суспензию. Метод не может быть использован при культивировании микроорганизмов на средах, в состав которых входят соединения, не растворимые в воде. [c.129] Определение биомассы состоит из трех последовательных операций доведения массы центрифужных пробирок или фильтров до постоянного значения, отделения клеток микроорганизмов от культуральной жидкости, определения их массы. Чаще всего определяют массу сухих клеток, хотя иногда можно ограничиться определением сырой биомассы. В последнем случае первый этап отпадает достаточно только взвесить центрифужную пробирку (фильтр), но не доводить ее массу до постоянного значения. Биомассу обычно выражают в граммах или миллиграммах на литр культуральной жидкости. [c.129] Доведение массы центрифужных пробирок или фильтров до постоянного значения. С этой целью фильтры, предварительно положенные в открытую чашку Петри, или центрифужные пробирки помещают в сушильный шкаф и высушивают в течение 1 —2 ч при температуре 80—85° и 90—100° соответственно. Затем чашку Петри с фильтрами или центрифужные пробирки вынимают из сушильного шкафа и переносят в эксикатор с безводным хлористым кальцием (СаСЬ) или концентрированной серной кислотой. Эксикатор ставят около аналитических весов, на которых будет проводиться взвешивание. Через час фильтры (центрифужные пробирки) взвешивают с точностью до 0,0001 г. Высушивание и взвешивание повторяют, соблюдая указанную последовательность операций, пока масса не достигнет постоянного значения, т. е. колебания в ее определениях не превысят 0,0001 г. [c.129] Мицелий актиномицетов и грибов отделяют фильтрованием. Бумажный фильтр помещают в стеклянную воронку и фильтруют через него точно измеренный объем культуры, от 5 до 10 мл. Осадок на фильтре многократно промывают подкисленной дистиллированной водой. [c.130] Для отделения бактерий используют мембранные фильтры. Размеры пор мембранного фильтра должны быть меньше величины клеток, биомассу которых определяют (характеристику фильтров см. гл. 3). Мембранный фильтр помещают на пористую пластинку специального держателя, вставленного в колбу. Чтобы ускорить фильтрование, колбу подключают к водоструйному насосу. Осадок несколько раз промывают подкисленной дистиллированной водой. Подробно порядок работы с мембранными фильтрами см. гл. 3. [c.130] Вернуться к основной статье