ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Исследование формы кривых при экстремальных концентрациях лиганда из "Биохимия мембран Кинетика мембранных транспортных ферментов" Использование области экстремальных концентраций для определения кинетических параметров связано с серьезными затруднениями. При сверхмалых и сверхбольших концентрациях лигандов относительная ошибка измерения может возрасти до такой степени, что любые определения в этой области станут недостоверными. Следовательно, возникает необходимость применять метод экстраполяции кривых, т. е. подогнать к точкам соседнего рабочего интервала аппроксимирующую функцию, в первом приближении— линейную регрессию. Однако эта процедура почти всегда дает недостоверные результаты (за исключением случая, когда форма кривой области исследования однозначно определяет поведение кривой и в соседних областях). [c.54] Таким образом, для решения задачи недостаточно выяснения зависимости формы кривой от искомых параметров. Необходимо подобрать такой вариант преобразования переменных, чтобы в области экстремальной концентрации лиганда форма кривой в рабочем интервале однозначно определяла бы поведение кривой в предельной области. Кроме этого требования, по-вндимому, необходимо и другое требование наличие ошибок измерения вынуждает использовать статистические методы оценки параметров и формы кривой. Исходя из этого нужно учитывать, что преобразование переменных сопровождается изменением ошибки, поэтому возможно ее нежелательное увеличение. При этом предпочтительнее использовать такое преобразование, которое позволяет работать в более широком диапазоне. Границу рабочего интервала, с одной стороны, определяет относительная ошибка, но так как с увеличением ферментативной скорости относительная ошибка, как правй-ло, уменьшается, то границу, с другой стороны, будет определять вид преобразования. [c.55] На основе вышеизложенного можно выделить варианты преобразования переменных, которые характеризуются тем, что в области экстремальных концентраций лиганда форма кривых зависит от параметров /гит. При этом разделим условно область экстремальной концентрации лиганда на рабочий интервал с малой относительной ошибкой и на предельную область, где из-за большой относительной ошибки применение аналитических методов исключается. Условимся, что нижние границы рабочего интервала и области экстремальных концентраций совпадают. [c.55] Для функции v/x в области экстремальных концентраций лиганда можно установить зависимость от степенных параметров п и т. Результаты суммированы в табл. 5 и на рис. П. [c.55] Результаты расчета предельных значений функции F/G и ее производных суммированы в табл. 6 и 7 и на рис. 12 и 13. [c.58] Обсуждаемый вариант преобразования имеет существенную отличительную черту. Все производные функции при конечных, отличных от нуля значениях аргумента могут иметь разрыв. Это обусловлено наличием в знаменателе члена (ро)- -А—1), который при ро)- - =1 равен 0. Кроме того, вторая производная также обнаруживает разрыв в точке 0=0 при условии х 2. [c.59] Степенное преобразование типа ii=0, v=—от l/x) наиболее перспективно с точки зрения применения аналитических методов для определения кинетических параметров. Эту функцию и ее производные можно легко получить из выражений (4.4) —(4.5) после соответствующей подстановки р, j.i, Я и v. [c.60] Более интересной является трансформация формы кривой при варьировании и, когда при значениях и =—1 и х = 0 появляются соответственно наклонные и горизонтальные асимптоты. При измерении р(Я = 0) появление горизонтальной асимптоты невозможно. [c.60] Рассмотрение этих вариантов показывает, что для приближения Р/О в области экстремальных концентраций к линейной зависимости необходимо варьировать параметры р и Я,. Ниже будет показано, как можно использовать эти преобразования для определения Лит. [c.62] Вернуться к основной статье