ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Анализ дробно-иррациональных функций из "Биохимия мембран Кинетика мембранных транспортных ферментов" Для уточнения схемы 3 желательно исследовать кинетические кривые с фиксированным отношением М/А. При фиксировании концентрации одного из лигандов системы S, А w М скорость формально становится функцией одного переменного. В этом случае учитывается воздействие на скорость всех трех лигандов. Правда, при достаточно больших концентрациях одного из свободных лигандов А или Ai), независимо от значения 5, можно пренебречь действием второго свободного лиганда, но тогда диапазон изменения концентрации фиксированного лиганда будет резко ограничен. Этих затруднений можно избежать, если использовать способ фик-сации отношения к—М/А. Тогда M=] k/(j.S и А=]/Кт / , где Кт — константа диссоциации комплекса MgATO. [c.74] Следовательно, при достаточно больших значениях X, из-за малой величины А можно пренебречь его действием на скорость, а при достаточно малых значениях К — действием М. Вышеизложенное хорошо иллюстрирует диаграмма на рис. 20. Следует отметить, что варьирование М в диапазоне Л1 0,1 мМ и А в диапазоне А С 0,02 мМ не вызывало достоверного изменения скорости реакции. Кроме того, оказалось, что при М 5 мМ действием А также можно пренебречь. Поэтому удовлетворительными можно считать отношения Я= 100 и А = 0,01. [c.74] При фиксированном отношении к М/А скорость реакции превращается в дробно-иррациональную функцию. При анализе формы таких кривых обнаруживаются некоторые сложности, однако возможность исключения действия одного из лигандов при широком диапазоне изменений двух остальных сильно облегчает расшифровку молекулярного механизма фермента. [c.74] Форма экспериментальных кривых 7о,о1=/(/) при малых значениях аргумента (рис. 21) выдвигает определенные ограничения для зависимости, рассчитанной по схеме 3. [c.76] Легко убедиться, что эти ограничения исключают возможность одновременного соблюдения условий аз/2 = 0 и 02=5 0 тогда остается три варианта 1) аз/2 = а2=0 2) аз/2=т 0, 2=0 и 3) аз/2= 0. [c.76] Выполнение этих условий возможно, если допустить, что (ао=0) или к рз — сравнительно малая величина (1//г°р5 . [c.76] Таким образом, модели, изображенные на схемах 3 и 4, могут объяснить форму экспериментальных кривых, полученных при фиксированном отношении MjA (A=100 и л = 0,01). [c.78] Принципиальное отличие экспериментальных кривых, получаемых автором и сотрудннками, от экспериментальных кривых, встречающихся в литературе, заключается в том, что в обратных координатах при малых значениях аргумента первые имеют нелинейный характер. Как правило, в литературе редко рассматривают область больших концентраций субстрата [MgATO] 1 мМ видимо, подразумевая, что при этих концентрациях существует линейная зависимость. Проверка формы кривых при фиксированном отношении Я=1 показала, что в обратных координатах в области 5=1 мМ наблюдается четко выраженное изменение наклона U tt .0), тогда как в соседних областях экспериментальные точки хорошо аппроксимируются прямыми линиями. Таким образом, при любых соотношениях M/S, М/А и A/S при достаточно малых значениях аргумента наблюдается отклонение кривых от линейности. [c.78] В заключение сформулируем условия, которые продиктованы формой экспериментальных кривых при Я= onst и которые следует учитывать при построении общей схемы вместе с условиями, перечисленными в предыдущем разделе. [c.78] Условие 7. При фиксировании A=AI/i4 в обратных координатах зависимость Ui=f t) является дробно-иррациональной функцией, которая не имеет асимптоты и при больших значениях аргумента является монотонно возрастающей, выпуклой функцией, стремящейся к бесконечности. [c.78] Условие 8. Форма кривых Uy,=f t) при малых значениях аргумента зависит от отношения Я. При 1 кривая имеет форму монотонно возрастающей, выпуклой функции, тогда как при малых значениях к превращается в монотонно убывающую, вогнутую функцию. [c.78] Вернуться к основной статье