ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Выбор среды из "Культура животных клеток Методы" Использование более сложных сред в отсутствие сыворотки обеспечивает два преимущества такие среды могут быть селективными для определенного типа клеток, а отсутствие сыворотки облегчает выделение из среды требуемых продуктов клеточного метаболизма. [c.18] Тем не менее культивирование в присутствии сыворотки проще и, как ни странно, часто оказывается не более дорогим, хотя, конечно, менее контролируемо. Две главные причины все еще ограничивают применение бессывороточных сред а) очень медленно растет выпуск коммерческих ингредиентов таких сред (не многие исследователи способны изготовлять среды собственными силами) и б) потребности в бессывороточной среде в большей степени зависят от типа используемых клеток. Сыворотка нивелирует многие недостатки среды, которые могут проявляться в ее отсутствие. Проблема может стать особенно острой при культивировании опухолевых клеток клеточные линии, происходящие из разных опухолей, могут требовать модификации культуральной среды. [c.18] В конце концов выбор среды все еще остается эмпирическим. Просмотрите литературу и выясните, какая среда использовалась ранее. Если использовалось несколько различных сред (как это чаще всего и бывает), проверьте все эти среды, а также некоторые другие по вашему выбору. Оцените рост культуры (время генерации и плотность насыщения) (см. ниже), эффективность клонирования (гл. 8), экспрессию специфических свойств (дифференцировка, размножение вируса, выход клеточного продукта и т. д.). Выбор среды может оказаться неодинаковым по этим параметрам так, например, дифферен-цнровка легочного эпителия лучше проходит в присутствии сыворотки, а размножение этих клеток — в отсутствие сыворотки. Если возможно, используйте в своей работе одну или несколько бессывороточных сред с добавлением в случае необходимости факторов роста, гормонов и микроэлементов (см. гл., 2). [c.18] Остановившись на каком-то одном типе среды, старайтесь как можно дольше его не менять. Аналогично прп использовании сыворотки постарайтесь обеспечить себя сывороткой одной партии на 0,5—1 год работы, прежде чем заменить ее на предварительно опробованную сыворотку другой партии. [c.18] Вернуться к основной статье