ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методы изучения микробного антагонизма и определения чувствительности патогенных бактерий к антибиотикам из "Микробиология с техникой микробиологических исследований изд.4" Изучение явлений микробного антагонизма привело к открытию специфических антибактериальных веществ, продуцируемых бактериями и грибами в окружающую среду. Они получили название антибиотиков (от греч. anti —против и bios — жизнь). [c.66] В настоящее время существует много антибиотиков, выделенных из бактерий, грибов и актиномицетов. Однако практическое применение в качестве лечебных препаратов нашли только немногие из них. [c.66] Каждый антибиотик действует на определенные чувствительные к нему виды бактерий. [c.66] Рациональная антибиотикотерапия инфекционных заболеваний основывается на результатах бактериологической диагностики заболевания с выделением и идентификацией возбудителя. При этом очень важно располагать сведениями о чувствительности возбудителя болезни к антибактериальному препарату, избранному для лечения. [c.66] В клинической практике чувствительными к антибиотикам считаются те микроорганизмы, на которые испытуемый антибиотик в концентрации, достигаемой в очаге инфекции, оказывает бактериостатическое или бактерицидное действие. При лабораторном испытании мерой чувствительности микроорганизмов к антибиотикам является минимальная концентрация препарата, подавляющая рост возбудителя заболевания при стандартных условиях постановки опыта. [c.66] Определение чувствительности возбудителя имеет особенно большое значение при выборе антибактериальных препаратов для лечения больных с хроническими, затяжными, вялыми формами инфекции, которые сопровождаются угнетением иммунологической реактивности макроорганизма. [c.67] Изучение чувствительности возбудителя к антибиотикам играет не менее важную роль в тех случаях, когда для лечения больных используются препараты, в отношении которых легко формируются устойчивые формы микроорганизмов (стрептомицин, тетрациклин, рифампицин и др.). [c.67] В настоящее время предложены критерии чувствительности микроорганизмов только для некоторых антибиотиков (табл. 5). [c.67] Культуры микробов для исследования на чувствительность следует выделять из организма больных до начала лечения, так как под воздействием назначаемых антибактериальных препаратов рост возбудителей заболевания может быть полностью угнетен. [c.67] Материал для Посева рекомендуется брать из очага инфекции непосредственно, а в тех случаях, когда это невыполнимо, из соответствующего отделяемого (моча при пиелонефрите, мокрота при воспалительных процессах в легких и т. д.). [c.67] При обнаружении в патологическом материале нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов необходимо установить, какой из них является ведущим в происхождении текущего инфекционного процесса. В решении этого вопроса большое вспомогательное значение имеют методы количественного учета микроорганизмов, так как преобладание, в патологическом материале какого-либо одного вида микробов свидетельствует, как правило, о причастности его к этио-лопии данного патологического процесса. [c.67] Примечание. + означает, что критерии чувствительности относятся ко всем лекарствен 1Ым формам названного антибиотика, х —группа не установлена. [c.68] Если выяснение истинного возбудителя болезни не удается или патологический процесс вызван микробной ассоциацией, чувствительность к антибиотикам необходимо исследовать раздельно у всех видов микроорганизмов (входящих в состав ассоциации), выделенных в чистой культуре. [c.68] Чувствительность микробов к антибиотикам определяется методом диффузии в агар с применением стандартных бумажных дисков или методом разведения в ЖИДКИХ и плотных питательных средах. [c.68] Техника постановки опыта. Стерильные чашки Петри диаметром 100 мм устанавливают на строго горизонтальную поверхно сть, наливают в них 2% мясо-пептонный агар (pH 7,2—7,4) в количестве 20 мл для создания оптимальной толщины слоя, равной 4—5 мм. Для тех видов микробов, которые не растут на мясо-пептонном агаре, как, например, стрептококки, пневмококки и др., применяют 5% кровяной или сывороточный агар. Перед посевом чашки со средой подсушивают в термостате для лучшей диффузии засеваемого материала в питательную среду. [c.69] Для засева чашек используют чаще всего 18—20-часовые (при интенсивном росте 4—5-часовые, при замедленном росте 2—3-суточные) бульонные и агаровые культуры микробов. Из агаровых культур готовят микробную взвесь, содержащую 1 млрд. микробных тел в 1 мл. [c.69] На поверхность подсушенной среды наносят исследуемую культуру микробов в объеме 1 мл. Посредством покачивания чашки культуру равномерно распределяют по поверхности -среды с последующим отсасыванием избытка жидкости пипеткой. Засеянные чашки 30—40 мин подсушивают при комнатной температуре, затем на поверхность засеянной и подсушенной среды с помощью стерильного остроконечного пинцета кладут диски, пропитанные разными антибиотиками. Каждый диск слегка прижимают браншами пинцета, чтобы он плотно прилегал к поверхности агара. Диски должны находиться на равном расстоянии друг от друга и на расстоянии 2—2,5 см от края чашки. Каждая чашка может служить для одновременного испытания штамма к действию 5— 8 антибиотиков. Засеянные чашки с нанесенными на них дисками на 18 ч помещают в термостат при 37 °С вверх дном, чтобы избежать попадания конденсационной воды на поверхность посевов. [c.69] Антибиотическое вещество, находящееся в диске, диффундирует в агар, формируя вокруг диска зону угнетения роста чувствительных к нему бактерий. Про1Ьсс диффузии антибиотика в агар заканчивается через 3—4 ч после нанесения диска. Наибольшая концентрация антибиотика отмечается в месте расположения диска по направлению к периферии содержание его снижается. [c.69] Бактерии, чувствительные к антибиотикам, образуют вокруг соответствующих дисков зоны угнетения роста, четко выделяющиеся на фоне сплошного микробного роста. Измерение зоны угнетения производят с помощью циркуля или миллиметровой линейки. Измеряемый диаметр зоны должен лроходить через центр диска. [c.69] При зоне задержки роста микроба диаметром до 10 М штамм расценивается как малочувствительный, зона задержки микробного роста более 10 мм свидетельствует о чувствительности штамма к исследуемому антибиотику. [c.70] Вернуться к основной статье