ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение вирулентности микробов из "Микробиология с техникой микробиологических исследований изд.4" Вирулентность — биологическое свойство микроба, харак- . теризующее степень его патогенности в момент исследования. В отличие от патогенности вирулентность является не видовым, а индивидуальным признаком микроба, который может усиливаться или ослабляться вплоть до полного исчезновения под влиянием различных факторов внешней среды. [c.108] Для характеристики вирулентности пользуются количественными показателями, определяющими способность исследуемой микробной культуры вызывать гибель искусственно зараженных ею подопытных животных. Изучение вирулентности бывает сопряжено с рядом трудностей, так как она определяется не только комплексом культурно-морфологиче-ских, токсигенных и биологических свойств микроба, но и резистентностью микроорганизма, подверженной большим колебаниям в связи с видом, возрастом животных, режимом их питания, температурой внешней среды, а также способом заражения, принятым в опыте. Поэтому при установлении вирулентности микроба очень важно вести исследование, точно-соблюдая стандартность всех условий опыта. [c.108] Для определения вирулентности микробных культур чаще всего используют белых мышей. В том случае, когда белые мыши невосприимчивы к исследуемому возбудителю заболевания, пользуются другими видами животных крысами, морскими свинками или кроликами. [c.108] Для определения вирулентности применяют молодую культуру микроба, так как старые культуры содержат большое количество мертвых клеток. [c.108] Исследуемую взвесь бактерий вводят различными способами внутривенно, внутрибрюшинно, внутримышечно, под-кожно, интраназально — в зависимости от целей и задач исследования. [c.109] Отстандартизованную взвесь микробов в изотоническом растворе хлорида натрия, а также разведения бульонной культуры готовят с таким расчетом, чтобы различные дозы микроба, используемые в опыте, содержались в одинаковых объемах жидкости. [c.109] Показатель LD50 позволяет получить более достоверные результаты, и потому он чаще других используется в практике экспериментальных исследований. [c.109] В отличие от Dim и Del, определявшихся непосредственно по результатам опыта, LD50 вычисляется путем довольно сложных математических расчетов. Более прост метод Кер-бера, в котором простота расчета удачно сочетается с достаточно высокой точностью получаемых результатов. [c.109] Метод Кербера предусматривает а) введение в опыт оди-иакового количества животных на каждую испытуемую дозу микробов б) постоянство величины отношений каждой последующей дозы микробов к предыдущей. [c.110] Пример. В табл. 10 приведены данные по установлению вирулентности культуры риккетсий цуцугамуши. В опыте использовано пять различных доз культуры, взятых в разведении Ю , 10 . .. Ю . Каждая испытуемая доза вводилась 6 подопытным мышам. [c.110] В патологии человека большую, роль играют токсигенные микроорганизмы, к которым относятся палочки ботулизма, столбняка, газовой анаэробной инфекции, дифтерии, а также некоторые штаммы бактерий дизентерии Григорьева — Шига, стафилококка и стрептококка. [c.110] Экзотоксины, вырабатываемые различными представителями этой группы микробов, обладают резко выраженной токсичностью, высокой избирательностью действия с поражением отдельных органов и тканей и способностью при парентеральном введении в организм вызывать образование антител— антитоксинов, способных нейтрализовать соответствующие им экзотоксины. [c.111] Продуцируемые в процессе жизнедеятельности микроба экзотоксины легко диффундируют из клетки в окружающую их питательную среду. Бульонную культуру микроба выдерживают в термостате в течение 2—3 нед для накопления в ней токсина, затем фильтруют через бактериальный фильтр. Получаемый при этом прозрачный фильтрат содержит нераз-веденный токсин. [c.111] Токсигенность микробов определяют по тому же принципу, что и вирулентность. Единицами измерения токсигенности, как и вирулентности, являются минимальная смертельная доза (Dim) и средняя смертельная доза (LD50). [c.111] Для определения Dim и LDso фильтрат бульонной культуры разводят стерильным изотоническим раствором хлорида натрия в сотни, тысячи и миллионы раз. Каждую дозу токсина испытывают одновременно на 6—10 животных. Для постановки проб подбирают животных, наиболее чувствительных к исследуемому токсину. Например, дифтерийный токсин титруют на морских свинках, столбнячный токсин — на мышах. [c.111] При учете полученных результатов в протоколе опыта от-, мечают дозу введенного токсина, способ его введения, массу тела животного и время наступления его гибели после введения токсина. [c.111] Вернуться к основной статье