ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Метод введения фармакологического вещества в перфузионный раствор из "Переживающий срез мозга как объект нейрофизиологического и нейрохимического исследования" Сравнительная простота введения изучаемого вещества в раствор без специальных сложных устройств, возможность точной дозировки вводимого фармакологического агента, широкий класс исрользуемых веществ, в том числе и газообразных — вот те преимущества, благодаря которым данный метод интенсивно используется в фармакологических исследованиях. [c.47] Для получения качественных эффектов того или иного вещества оно просто вводится с помощью шприца, пипетки в перфу-зионную жидкость или в предкамеру, илн в рабочую камеру, прн этом регистрируется вызванная или спонтанная активность нейронов. [c.47] Точная количественная оценка действия фармакологических агентов требует определенной экспозиции среза в среде. Время, через которое изучаемый раствор достигнет среза, легко выяснить, добавив краситель в перфузионный раствор. Если скорость перфузии не меняется от опыта к опыту, то это время будет постоянно и нет необходимости проверять его перед каждым экспериментом. [c.47] Соответствует ли концентрация исследуемого вещества в растворе концентрации его внутри структур среза и как быстро наступает это равновесие На эти вопросы нельзя дать однозначного ответа. В экспериментальной практике обычно принято считать, что фармакологические агенты при перфузии среза одинаково быстро достигают всех структур среза. С теоретической точки зрения диффузия фармакологических веществ в различные структуры среза неодинаково зависит от ряда факторов коэффициента диффузии данного вещества в мозговой ткани, плотности упаковки и биохимических особенностей нейрональных элементов в конкретных местах среза. В поле СА1 гиппокампа клеточные тела расположены близко друг к другу по сравнению с расположением клеток в поле САЗ. Эти анатомические особенности непременно должны влиять на диффузию фармакологических агентов. [c.47] Как можно интерпретировать полученные результаты Совершенно очевидно, что галотан не оказывает влияния на синхронную афферентную волну ЛОТ, так как амплитуда и длительность ее не меняются при воздействии галотана и они остаются стабильными на протяжении всего времени наблюдения. Кроме того, стабильность потенциала действия ЛОТ свидетельствует о том, что число активированных синапсов сохранялось неизменным. [c.48] Депрессия ВПСП указывает на уменьшение эффективности синаптической передачи, которое может выражаться в уменьшении выделения медиатора в ответ на приходящий импульс. [c.48] Исходя из различного реагирования нейронов на галотан (возникновение ПД и его отсутствие), можно допустить наличие по крайней мере двух популяций синапсов, отличных по скорости реагирования на анестетик. Одна популяция синапсов быстро реагирует на воздействие галотана и их эффективность падает, другая — резистентна к действию галотана и продолжает функционировать. Поиск таких типов синапсов был бы, как нам представляется, интересным продолжением этих исследований. [c.48] Л — компоненты фокального потенциала, амплитуда которых измерялась в эксперименте Б—изменение величины популяционного спайка (2) В—изменение амплитуды потенциала действия лот (3), популяционного ВПСП (1) и напряжения галотана в газовой среде, подаваемой иа срез (4). По оси абсцисс, время, мин. По оси ординат величина первого популяционного спайка, условные единицы (5) амплитуда ВПСП и ПД ЛОТ, мВ (В, слева) и концентрация галотана в газовой струе, % (В, справа). [c.49] Методика введения веществ в перфузионный ток позволяет построить кривые доза—эффект. Такие исследования дают возможность установить нелинейные зависимости электрической активности от концентрации изучаемого вещества. Так, в недавнем исследовании было показано, что введение в перфузионный раствор 5 мкМ норадреналина сопровождается ростом амплитуды популяционного спайка в срезах гиппокампа, 10—25 мкМ концентрация агента вызывала фазные реакции — первоначальное увеличение амплитуды популяционного спайка с последующим его угнетением. Дальнейшее возрастание концентрации норадреналина (50 мкМ) сопровождалось только угнетением регистрируемого спайка (Mueller et al., 1981). Описанный метод позволяет исследовать в срезах мозга эффекты различных веществ, определять место и механизм их действия, вести целенаправленный поиск новых лекарственных препаратов. [c.50] Вернуться к основной статье