ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Обмен белков из "Переживающий срез мозга как объект нейрофизиологического и нейрохимического исследования" Роль белков в нервной системе подробно описана рядом авторов (Палладии и др., 1972). Изучение их метаболизма представляет несомненный интерес для понимания механизмов деятельности мозга. Определение факторов, регулирующих скорость метаболизма белков в условиях in vivo, связано с большими техническими трудностями. В то же время подобные исследования на срезах не вызывают серьезных затруднений. [c.91] После инкубации срез извлекают из среды, промывают примерно 1.5 мин нерадиоактивной средой и гомогенизируют в 2—4 мл 3%-ной сульфосалициловой кислоты. Гомогенат центрифугируют при 10 тыс. g 6 мин. Супернатант и осадок используют для дальнейшего анализа содержания и радиоактивности используемой аминокислоты. [c.92] Количество белка в сухом осадке определяют по методу Лоури (Lowrey, 1951) и путем взвешивания. Полученный белок используют для определения радиоактивности и аминокислотного состава. [c.92] Для определения аминокислотного состава часть белка гидролизуют 3—12 мг белка фиксируют под вакуумом с 5 мл 6 н НС1 и нагревают при 110 °С 24 ч. После высушивания на воздухе гидролизат растворяют в цитратном буфере pH 2.2 (Reith et al., 1979) и обрабатывают так же, как и сульфосалициловый экстракт для определения количества и радиоактивности аминокислот. [c.92] Для определения радиоактивности аликвоты сульфосалицило-вого экстракта, среды или гидролизата доводят до 2.4 мл и смешивают с 12 мл сцинтилляционной смеси. Содержание аминокислот определяют оптическими методами после хроматографического разделения смеси. [c.92] Истинный распад может быть отрицательной величиной (Оип-р е1 а1., 1981), если скорость распада будет меньше скорости нтеза. [c.94] В настоящее время исследования метаболизма белков с по- щью срезов проводятся недостаточно широко, хотя именно этот тод позволяет дать строгую количественную оценку различных ) сторон. [c.94] Вернуться к основной статье