ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Количественная оценка гемагглютинина, экспрессированного из рекомбинантных геномов из "Генетика вирусов гриппа" Все описанные выше рекомбинантные векторы экспрессируют гликопротеид НА, который не различается во всех изученных отношениях от НА, синтезированного во время естественной гриппозной инфекции. Для установления этого положения, т. е. того факта, что синтезированное образование — подлинный по своей структуре, антигенности и биологическим активностям гликопротеид НА, были проведены серии экспериментов в клетках, инфицированных различными рекомбинантами, включаюш,ие иммунопреципитацию, иммунофлюоресценцию, гемагглютинацию и тесты слияния клеток (рис. 30). Эти эксперименты были детально описаны ранее [5, И, 24, 28] и очень коротко будут обсуждены здесь. [c.172] Иммунофлюоресценция клетки, инфицированные ЗУ40-НА-рекомбинантами, показывали яркую цитоплазматическую флюоресценцию с особенно интенсивным окрашиванием аппарата Гольджи. Поверхность клеток также специфически окрашена, характеризуясь однородным флюоресцентным свечением. Распределение флюоресценции в клетках, инфицированных вирусом гриппа, было подобно распределению, характеризующему клетки, инфицированные рекомбинантами, но с более низкой интенсивностью. [c.172] Гемагглютинация и связывание эритроцитов с инфицированными клетками эритроциты морской свинки могут быть агглютинированы экстрактами клеток, инфицированных рекомбинантными вирусами. Интактные монослои инфицированных клеток адсорбировали плотный ковер эритроцитов на своей поверхности. [c.172] Детали протоколов экспериментов были описаны ранее [5, 28]. [c.173] Эти результаты показывают, что клонированный ген НА может быть экспрессирован на очень высоких уровнях, когда он связан либо с ранним, либо с поздним 8У40 промотором. Однако ЗУЬНА8 (интрон+)-инфицированные клетки продуцируют значительно меньшие количества антигена НА (см. табл. 13). Причина этой уменьшенной продукции НА будет обсуждена в следующем разделе. [c.174] Вернуться к основной статье