ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Повышение эффективности трансляции матричных РНК из "Генетическая инженерия" МО отметить, что кодирующая белок последовательность мРНК ограничена на 5 - и З -концах некодирующими участками. [c.149] Эти результаты показывают, что последовательность нуклеотидов участка связывания рибосом может существенно влиять на эффективность трансляции структурной части изучаемого гена, однако конкретной закономерности установить не удалось. Тем не менее полученные данные натолкнули исследователей на идею разработать общий подход к статистической оптимизации трансляции мРНК, детерминируемой клонированным геном. [c.151] С использованием разработанной методики была оптимизирована экспрессия в Е. соЫ кодирующих последовательностей /З-глобина кролика, фибробластного интерферона человека и некоторых дрзтих. [c.152] Несмотря на то, что механизмы регуляции трансляции изучены пока недостаточно полно, при конструировании гибридных генов, предназначенных для автономной трансляции целевого белка в Е. соН, активно используют природные или синтетические последовательности ДНК, кодирующие SD-участки и прилегающие к ним области. Это позволяет создавать эффективно функционирующие районы связывания рибосом на гибридных мРНК. Чаще всего используют SD-участки генов белка оболочки фага MS2, la Z Е. oli и сП фага А. [c.152] Таким образом, клонирование кодирующих последовательностей в многокопийных векторах под сигналом транскрипции сильных промоторов, разработка экспериментальных схем оптимизации трансляции мРНК через оптимизацию структуры участка связывания рибосом позволяют достигать в бактериальных клетках необычайно высокого уровня продукции белков различного происхождения. [c.152] Вернуться к основной статье