ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Направленный мутагенез молекул ДНК из "Генетическая инженерия" Для генетического анализа какого-либо вида организмов необходимо выявление мутантов с определенными физиологическими дефектами (отличиями от особей, принятых за дикий тип). До недавнего времени такие мутанты получали только в результате статистического (случайного, ненаправленного, общего) мутагенеза популяции организмов с последующей селекцией или отбором мутантов, обладающих характерным фенотипом. Измененный ген в выделенных мутантах может быть затем локализован на геноме путем комплементационного или рекомбинационного анализа с другими мутантами или методами физического картирования. Появление методов генетической инженерии позволило с помощью клонирования в молекулярных векторах извлекать отдельные гены даже из очень больших и сложно организованных геномов. Для клонированных генов может быть расшифрована последовательность нуклеотидов, а на ее основе — аминокислотная последовательность кодируемого белка. Более того, можно клонировать, а затем сравнивать последовательности гена (белка) дикого типа и мутантных форм. Исходя из полученной информации можно определить, какие изменения структуры гена (белка) приводят к тому или иному изменению фенотипа организма. [c.171] Недостатком данного подхода является то, что фенотипически проявляются, как правило, далеко не все мутации по определенному гену, а только те, которые значительно нарушают функцию этого гена. Кроме того, мутации по разным участкам изучаемого гена могут иметь одно и то же фенотипическое проявление. Поэтому тонкий анализ структурно-функциональной организации гена (и/или кодируемого им белка) с помощью данного классического молекулярно-генетического подхода затруднен. [c.171] Возможность вводить в изолированный ген заранее запланированные мутации — делеции, вставки или специфические замены нуклеотидов — была настолько заманчивой, что побудила большую группу ученых разных лабораторий к разработке методов направленного мутагенеза in vitro. [c.171] Вернуться к основной статье