ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Олигонуклеотид-направленный мутагенез из "Генетическая инженерия" Разработанный на модельной системе фага 0X174 метод олигонуклеотид-направленного мутагенеза получил дальнейшее развитие на других типах молекул ДНК, прежде всего на ДНК нитевидных фагов и плазмидах. У плазмид приходится получать одноцепочечные кольцевые формы при определенных ферментных обработках двухцепочечной ДНК in vitro, что обычно осуществить не очень просто. Поэтому наиболее широко используют нитевидные фаги, и в первую очередь фаг М13. На кольцевой одноцепочечной ДНК фага М13 удобно достраивать вторую цепь. Кроме того, создана серия векторных молекул на основе ДНК фага М13, и данный фаг с успехом используется при секвенировании клонированных последовательностей ДНК методом Сэнгера. [c.183] Недостатком классического варианта олигонуклеотид-направленного мутагенеза ДНК фага М13 являлось то, что выход гибридов обычно не превышал 5 %. Поэтому требовалось подобрать условия, которые позволили бы приблизиться к уровню 50 %, а может быть, и превысить его. [c.183] Блестящие успехи в разработке методов химического синтеза олигонуклеотидов, доступность высокоочищенных ферментов нуклеинового обмена привели к тому, что процедуры сайтспецифического мутагенеза могут при необходимости применяться в любой молекуляр-но-биологической лаборатории. Данные методы стали неотъемлемой частью исследований, направленных на изучение структурно-функциональной организации генов и белков. Некоторые из этих работ рассмотрим в следующей главе. [c.185] Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза. М, Мир, 1978. 463 с. [c.185] Гусев В. А., Каргинов В. А., Кравченко В. В. и др. [c.185] Модификация операторно-промоторного участка ДНК фага лямбда в составе специфического комплекса с РНК-полимеразой Es heri hia oli 11 Докл. АН СССР. 1981. Т 260. С. 753-756. [c.185] Миллер Дж. Эксперименты в молекулярной генетике. М. Мир, 1976. 436 с. [c.185] Салганик Р. И., Дианов Г. Л., Курбатов В. А. и др. Направленное воздействие на геном бактериофага Т7 с помощью транскрипта области ранних генов, несущего множественные алкилирующие группы // Докл. АН СССР 1978. Т 239. [c.185] Вернуться к основной статье