ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы ВЫДЕЛЕНИЕ МИТОХОНДРИЙ И АНАЛИЗ ИХ ЭНЕРГЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ из "Методы изучения митохондрий растений Полярография и электрофорез" Дыхательная цепь состоит из более чем 20 различных переносчиков электронов и множества структурных белков. С помош ью детергентов дыхательную цепь можно разделить на четыре белковых комплекса (I, II, III, IV) (Рис. 2). [c.6] Комплекс I (НАДН-дегидрогеназа) обеспечивает перенос электронов от НАДН на убихинон (Q). Комплекс II называется сукцинатдегадрогеназой и транспортирует электроны от сукцината к убихинону. Комплекс III (цитохром с редуктаза) осуществляет перенос электронов от убихинона к цитохрому с. Комплекс IV (цитохром с оксидоредуктаза) является терминальным комплексом в цепи переноса электронов. Электроны, пройдя цепь переносчиков, теряют значительное количество свободной энергаи, этого количества энергии достаточно для синтеза трех молекул АТФ. В дыхательной цепи есть три участка, где выделяемая свободная энергия используется для синтеза АТФ. Эти участки являются пунктами энергетического сопряжения между переносом электронов и синтезом АТФ. Первый участок от НАДН до убихинона, второй - от убихинона до цитохрома С/, третий - от цитохрома с до кислорода (Рис. 2). [c.7] Митохондрии растений и животных имеют сходную организацию дыхательной цепи, хотя между ними имеются определенные различия. Растительные митохондрии имеют альтернативный цианид-резистентный путь переноса электронов и способны окислять экзогенный НАДН. [c.8] Важным инструментом при изучении последовательности и механизмов реакций фосфорилирования в дыхательной цепи являются специфические ингибиторы. Согласно Рэкеру (Рэкер, 1979), существует три класса соединений, препятствующих окислительному фосфорилированию. [c.8] Перенос электронов в комплексе II ингибируется теноилтрифторацетоном, который является избирательным ингибитором сукцинатдегидрогеназы, а также малонатом и оксалоацетатом. [c.9] Комплекс III ингибируется антимицином, который является антибиотиком. Он блокирует перенос электронов между цитохромом Ъ и убихиноном в протонпроводящем Q-цикле. Блокирование происходит при низких концентрациях - при связывании 1 моля ингибитора с 1 молем фермента (Николс, 1985). [c.9] Ингибитором АТФ-синтетазы является олигомицин. Он тормозит ДНФ-стимулируемую АТФазу, дыхание в состоянии 3 по Чансу-Вильямсу (Рис. 3) и не влияет на дыхание в присутствии разобщителей (Скулачев, 1989). [c.10] Разобщители способны пересекать мембрану, катализируя при этом электрогенный унииорт протонов, и понижают сопротивление мембраны для протонов. Возникающий при этом ток приводит к короткому замыканию и разобщению генератора АТФ-синтетазы (цит. по Николсу, 1985). [c.11] Вернуться к основной статье