Хроматография аминосахаров

Методы количественного определения гексозаминов . Ввиду исключительно важной роли, которую играют 2-амино-2-дезоксигексозы в построении биополимеров и в биохимических процессах, необходимы надежные методы количественного определения этих моносахаридов. Однако ни один из известных методов количественного определения гексозаминов не является специфическим получаемые результаты зависят от наличия в смеси обычных моносахаридов и аминокислот, которые наряду с аминосахарами всегда образуются при гидролизе мукополисахаридов и гликопептидов. Поэтому все современные методы анализа аминосахаров включают стадию отделения их от аминокислот, других моносахаридов и неорганических солей с помощью ионообменной хроматографии [c.280]

После предварительной оценки на основании данных хроматографии, электрофореза и качественных цветных реакций следующим этапом в установлении строения аминосахаров является превращение в нейтральные моносахариды или аминокислоты известного строения. Однако для решения этого сложного вопроса стандартные подходы отсутствуют, и в каждом случае в зависимости от положения, числа и характера аминогрупп он решается индивидуально. [c.281]

Электрофорез особенно успешно применяется для обнаружения моносахаридов, в молекуле которых имеются основные (как в аминосахарах) или кислые (как в альдоновых, уроновых, сахарных кислотах, фосфатах и сульфатах сахаров) группировки (см., например, ). В тех случаях, когда необходимо разделить нейтральные моносахариды, используют их способность образовывать отрицательно заряженные комплексы с борной кислотой или ее солями , с молибдатами , вольфраматами, германа-тами и рядом других неорганических анионов разные анионы предъявляют часто различные требования к стереохимии моносахарида, необходимой для образования устойчивых комплексов. Естественно поэтому, что выбор комплексообразователя и условий проведения электрофореза, в первую очередь pH растворов, весьма существенно влияет на результат разделения (см. ). Для обнаружения зон веществ на электрофореграммах применяется большинство реагентов, используемых при хроматографии на бумаге. [c.411]

Применение смесей бутанола, муравьиной кислоты и воды для бумажной хроматографии аминокислот и аминосахаров [308]. [c.222]

Продукты IV и V, содержащиеся в маточном растворе или исходной смеси, можно разделить методом колоночной хроматографии на силикагеле. Рекомендуемое соотношение разделяемая смесь—сорбент, 1 40. Градиентное элюирование смесями хлороформ — спирт (О—>-5% спирта) дает возможность количественно выделить чистые производные аминосахаров IV и V. [c.191]

Этим же методом, а также с помощью хроматографии на ионообменниках в нем были обнаружены и гексозамины — глюкозамин и небольшое количество галактозамина [25, 14]. Фетуин содержит 30 ацетильных групп на 48 400 г из них 17 оставалось после удаления сиаловой кислоты, следовательно, аминосахара в фетуине полностью К-ацетилированы [27]. Данные-о количественном содержании сахаров в фетуине приведены в табл. 2. [c.62]

При наличии в анализируемом объекте >-глюкозамина и >-галактозамина долгое время удавалось определять только сумму аминосахаров. Разделение этих моносахаридов было впервые осуш ествлено в виде их Ы-2,4-динитрофенильных производных методом хроматографии на бумаге или кизельгуре . Затем был предложен более удобный способ разделения О-глюкозамина и О-галактозамина методом ионообменной хроматографии после разделения каждую фракцию можно анализировать по методу Эльсона —Моргана. [c.281]

Кислые мукогюлисахариды в соединительной ткани связаны с белка- ми (см. стр. 602), поэтому для их выделения, как правило, проводят предварительное разрушение белков протеолитическими ферментами или расщепление углевод-белковых связей щелочами, после чего полисахариды экстрагируют растворами солей . Белки, также переходящие при этом в раствор, удаляют с помощью денатурирования. Смеси мукополисахаридов можно разделить на компоненты фракционированным осаждением спиртом в виде солей с различными катионами , но лучшие результаты дает фракционированное осаждение цетавлоном или ионообменная хроматография . Особенности химического поведения мукополисахаридов сделали чрезвычайно сложной задачу установления их строения. Даже идентификация моносахаридов после полного кислотного гидролиза (обычно одна из самых простых операций) является в мукополисахаридах трудной проблемой. Наличие в одной молекуле уроновых кислот и аминосахаров приводит к тому, что полисахариды гидролизуются лишь в жестких условиях, при которых освобождающиеся уроновые кислоты подвергаются интенсивному разрушению. Поэтому в последнее время работу по установлению строения этих веществ проводят на модифицированных полисахаридах, в которых сульфатные группы удалены, а все карбоксильные группы уроновых кислот восстановлены в первичноспиртовые. Ряд других классических методов установления строения полисахаридов применим к мукополисахаридам с трудом это относится к перйодат ному окислению, вызывающему разрушение остатков уроновых кислот вследствие сверхокисления, к метилированию, в применении которого успехи достигнуты сравнительно недавно. Основными методами, позволившими выяснить строение мукополисахаридов, послужили методы частичного гидролиза и частичного ферментативного расщепления. [c.541]

Канамицины А, В и С содержат в молекуле остаток 3-амино-З-дезокси-О-глюкозы. Этот аминосахар, обладающий в свободном виде антибактериальной активностью, был выделен из Ba illus aminoglu osidi us ионообменной хроматографией [26,27]. [c.214]

Много работ опубликовано по хроматографии углеводов, особенно В. В. Рачинским, Б. Н. Степаненко. Установив зависимость между структурой и величиной Rf, можно оценить степень полимеризации олигосахаридов, влияние положения оксигрупп. На бумаге из стеклянных волокон, предварительно забуференной, можно четко разделять различные монозы, биозы, триозы, галактуровую и глюкуроновую кислоты. В микроорганизмах можно определять связанные углеводы, свободные MOHO- и дисахариды в растительном материале, также свободные олигосахариды, свободные углеводы в крови и моче, молоке, наблюдать гидролиз и синтез олиго- и полисахаридов, энзиматические превращения моносахаридов в связи с процессами окисления, восстановления, изомеризации, реакции углеводов с азотсодержащими соединениями, контролировать чистоту углеводов и идентифицировать их, определять кислоты и ла-ктоны, уроновые кислоты, кетокислоты, метилированные сахара, дезоксисахара, аминосахара, полисахариды, инозит, сорбит, эфиры фосфорной кислоты, структуру галактоманнана, эремурана, новых галактозидов, проследить превращение сахарозы, синтез олигосахаридов в растущей культуре. Бумажная хроматография применяется в сахарной промышленности, в пивоварении. Мало еще разработана теория распределительной хроматографии углеводов, мало изучены возможности разделения оптических изомеров и антиподов. [c.201]

Аминосахара — кристаллические вещества, хорошо растворимые в воде. СЬй имеют свойства, характерные аминам-моносахаридам, являются сильными основави ями и образуют устойчивые соли. Аминогруппа легко ацетилируется и алкилируется. При действии щелочей и азотной кислоты происходит дезаминирование аминосаха ров. Для получения и анализа аминосахаров используют методы ионообменной хроматографии с последующим колориметрическим определением. [c.169]

Газовая хроматография сахаров в виде тр ифтор ацетатов. (Разделение моно- и дисахаридов, аминосахаров и метилглюкозидов, НФ силикон на хромосорбе Р.) [c.139]

Быстрый и точный метод определения качественного и количественного углеводного состава гликосфинголипидов основан на газовой хроматографии метилгликозидов, образующихся при кислотном метанолизе гликолипида. Газовая хроматография позволяет надежно определять наномолярные количества гликосфинголипидов в исследуемом материале. После проведения метанолиза метилгликозиды аминосахаров превращают в их Ы-ацетильные производные идентификацию и количественное определение метилгликозидов проводят методом газовой хрома- [c.14]

Метод позволяет после окисления нингидрином смеси двух сахаров идентифицировать 2—5 мкг одного из них в присутствии 100 мкг другого [194]. Образующиеся пентозы идентифицируют хроматографией иа бумаге (например, в смеси к-бутапол — спирт — вода, 4 1 1, по объему) или распределительной хроматографией на колонках [133]. При этом нет необходимости в предварительном отделении аминосахаров от нейтральных сахаров и аминокислот. Метод можно использовать для количественных определений ясно, однако, что таким способом нельзя отличить в-глюкозадшн от в-маппоза-мина или D-галактозамин от о-талозамина. [c.213]

На первой стадии исследования гидролизата целесообразно разделить метилированные производные нейтральных сахаров и гексозаминов. Для этого может оказаться удобным электрофорез в слабокислых средах на колонках Пората. Нередко применяют ионообменную хроматографию на колонках с сильным катионитом в Н+-форме. На колонку наносят смесь метилированных сахаров, после чего нейтральные сахара элюируют водой, а аминосахара, несущие заряд,— разбавленной минеральной кислотой [114, 135, 136, 1471. [c.258]

Современный уровень наших знаний не позволяет еще установить, состоит ли углеводная часть гликопептида из одного или нескольких гетеросахаридов. После обработки казеиногликопептида проназой было выделено несколько гликопептидов, содержащих только галактозамин [ИЗ], но тип связи между пептидом и аминосахаром точно не установлен. Перйодат быстро разрушает большую часть остатков К-ацетилнейраминовой кислоты если перйодат реагирует с х-казеиногликопептидом, предварительно обработанным нейраминидазой, разрушается 50% галактозы, но не галактозамина [ИЗ]. Эти опыты, по-видимому, подтверждают предположение, что аминосахар находится вблизи пептидного участка молекулы. Наконец,интересно отметить, что только один из трех пептидов, полученных при фракционировании с помощью колоночной хроматографии х-казеиногликопептида, обработанного химотрипсином, содержит все углеводы, присутствующие в исходном х-казеине [113]. [c.51]

Хроматографию проводили на бумаге Р111гак РЫ-З в системе растворителей н-бутанол пиридин вода (6 4 3). Для обнаружения моносахаров и аминосахаров использовали щелочной раствор азотнокислого серебра и 0,2% раствор нингидрина в ацетоне. Газожидкостную хроматографию проводили на хроматографе Руе-ип1сат104 с пламенно-иони-зационным детектором на стеклянных колонках А-(150-0,4 см), содержащих 3% РЕ-1 на газохроме р (100—120 меш). Моносахара анализировали в виде ацетатов полиолов (175—225°, 5°/мин). [c.86]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология