Метод вытеснения профлавина. Растворы химотрипсина смешивали при pH 6 и 25 С в приставке к спектрофотометру, предназначенной для проведения исследований методом остановленной струи. Связывание субстрата протекало слишком быстро, чтобы его можно было зарегистрировать. Быстрое экспоненциальное уменьшение поглощения обусловлено вытеснением профлавина из фермента при образовании ацилфермента. Медленное увеличение поглощения отражает исчерпание субстрата и последующее уменьшение стационарной концентрации ацилфермента .