ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Катехоламины из "Справочник биохимии" При хроматографии катехоламинов в первую очередь следует учитывать их тенденцию к окислению, особенно при pH 6. По этой причине следует избегать применения растворителей с основными свойствами. Чаще всего используют фенол и и-бутанол с добавками водных растворов различных кислот. Хроматографию проводят в атмосфере 802, СО 2 или азота, особенно если в качестве растворителя используют фенол, а в качестве дополнительной защиты от окисления бумагу перед употреблением можно обработать разбавленным раствором аскорбиновой кислоты (50 мг/100 мл). [c.386] Катехоламины могут образовывать комплексы или соединения с трихлороуксусиой или молочной кислотой при обработке тканевых экстрактов эти комплексы и соединения могут проявляться на хроматограммах в виде отдельных пятен. [c.386] Рекомендуется ацетилировать катехоламины перед их разделением хроматографией на бумаге или ТСХ. [c.386] Н-Метиладрепалин при окислении не дает окращивания, так как невозможно замыкание индольного кольца, но в результате восстановления обесцвечивается феррицианид, который может быть идентифицирован путем добавления очень разбавленного раствора сульфата меди, что приводит к появлению красного окращивания. Окружающий его невосстановленный феррицианид при этом становится коричневым. [c.387] Образование ферроцианида может быть продемонстрировано реакцией образования берлинской лазури. Хроматограмму опрыскивают раствором, содержащим 5 г безводного сульфата железа(П1) и 75 мл 85%-ной Н3РО4 на 1 л. Эта реакция, указывающая в основном на присутствие восстановителя, менее специфична, чем появление окраски, наблюдаемое после единственного опрыскивания феррицианидом. [c.387] Адреналин, норадреналин, допамин, изопропилнорадреналин и эпинин дают пятна от красного до пурпурного цвета (чувствительность 1- 2 мкг), которые обнаруживают желто-зеленую флуоресценцию в УФ-свете (чувствительность 0,2 мкг). [c.387] Первое опрыскивание 0,2% раствором К.зРе(СК)й в воде или 0,0005 М раствором иода в 0,2 М ацетатном буфере (pH 6) или 0,005 М иодом в 0,6 М фосфатном буфере (pH 5,9). Высушивают в потоке холодного воздуха в течение 3-5 мин. [c.387] Второе опрыскивание раствором 4 г -диметиламинобензальдегида в 380 мл этанола -I- 80 мл конц. НС1. Предел обнаружения 0,2 мкг адреналина или норадреналина. [c.387] Хроматограмму опрыскивают раствором 0,1%-ного КзРе(СЫ)в или 0,05 М в 5%-ном (об./об.) водном этилендиамине. Высушивают в течение 5 мин при 50°С. [c.388] Растворы для погружения. Хроматограмму погружают в 1 %-ный раствор иода в тетрахлориде углерода, промокают и, не дожидаясь полного высыхания бумаги, погружают в 1 %-ный раствор этилендиамина в изопропаноле, вновь промокают и высушивают при комнатной температуре в течение 24 ч. Чувствительность 0,05 мкг катехоламинов. [c.388] Вернуться к основной статье