ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Элюирование хроматограмм органических соединений из "Тонкослойная хроматография в органической химии" После нанесения опытных проб на пластинку с адсорбентом последнюю помещают в камеру для хроматографии, на дно которой предварительно наливают небольшое количество растворителя (подвижная фаза) высота жидкости - 0,5 см. [c.28] К настоящему времени предложено много разновидностей камер для хроматографии в тонких слоях [2, 13, 14, 16, 27]. Удобной в работе оказалась так называемая сэндвич-камера или С-камера, для которой необходимо небольшое количество растворителя. Задней стенкой в С-камере служит пластинка с адсорбентом, а передней стенкой — стекло такого же размера. При употреблении С-камер не требуется предварительного насыщения камеры растворителем и обеспечивается экономия элюирующего раствора. [c.28] Необходимо обращать внимание на чистоту растворителей. Иногда требуется проводить дополнительную очистку растворителей. [c.29] При работе с закрепленным слоем продвижение растворителя на пластинке обычно не должно превышать 10—12 см, так как в противном случае наблюдается замедление движения фронта растворителя, диффузия пятен и большие колебания Rf При работе с незакрепленными слоями пластинку обычно ставят под углом 10— 15°, длина продвижения растворителя на пластинке обычно не вызывает больших колебаний Rf. [c.29] Метод нисходящей хроматографии характеризуется подачей растворителя на пластинку сверху вниз. В этом случае в верхнюю часть камеры над пластинкой с сорбентом помещают лоток, содержащий растворитель. Лоток соединяют с пластинкой при помощи фильтровальной бумаги. Скорость подачи растворителя при этом можно регулировать, используя фильтровальную бумагу различной толщины. [c.29] При горизонтальной хроматографии в тонких слоях пластинка в камере расположена строго горизонтально. В зависимости от способа подачи растворителя и приема, применяемого для нанесения пробы, могут быть следующие разновидности метода. [c.29] Двумерная хроматография. Иногда при хроматографии в тонких слоях применяют специальную технику с целью получать лучшее разделение испытуемых веществ и добиться концентрирования хроматографируемых соединений, например, проводят разделение сначала в одном направлении, а затем в другом, перпендикулярном первому. [c.30] Интересен также другой прием, позволяющий сконцентрировать и затем препаративно выделить хроматографические пятна, полученные после разделения опытной смеси на тонких слоях [36]. Сначала проводится обычное разделение в одном направлении. Затем хроматографические пятна (видимые, например, в ультрафиолете) оставляют на пластинке в виде небольших выступов, удаляя адсорбент с части пластинки. После этого на выступы с пятнами накладывают небольшие полоски фильтровальной бумаги и производят разделение в направлении, перпендикулярном первоначальному (рис. 8). [c.30] Градиентная хроматография. В последнее время в тонкослойной хроматографии все шире начинает использоваться метод градиентной жидкостной хроматографии [9]. По сравнению с обычными условиями хроматографии использование различных видов градиента позволяет значительно улучшить разделение анализируемой смеси и расширяет возможности этого метода. [c.31] В тонкослойной хроматографии могут быть применены следующие типы градиента. [c.31] При хроматографии в тонком слое можно использовать также и различия в направлении этих градиентов на пластинке по отношению к направлению потока элюирующего раствора. [c.31] Градиент подвижной фазы. В этом случае в процессе хроматографии происходит непрерывное изменение концентрации (или полярности, или pH) подвижной фазы. [c.31] Градиент концентрации подвижной фазы был использован [37] для разделения нуклеотидов на ДЭАЭ-целлю-лозе. Для создания градиента концентрации элюирующего раствора (раствор бикарбоната аммония) использовали двухкамерный аппарат, перемешивание раствора осуществляли при помощи магнитной мешалки. На конце пластинки находилась бумажная масса для удаления избытка элюента, поступающего на пластинку (рис. 9). [c.31] Градиент неподвижной фазы был применен для разделения смеси кетонов [16] при этом в качестве стационарной фазы были использованы одновременно два различных адсорбента (активированный уголь и кремневая кислота) на одной и той же пластинке. Примером использования градиента неподвижной фазы является также разделение смеси красителей [39] на пластинке с силикагелем и кизельгуром, растворитель— бензол. [c.32] Градиент неподвижной фазы был применен и для разделения стероидов [40]. В качестве адсорбента был использован силикагель, импрегнированный нитратом серебра. [c.32] Другим примером использования градиента неподвижной фазы является сочетание на одной пластинке кислых и щелочных слоев адсорбента (рН-градиент) [41]. [c.32] Градиент среды [42—44]. Для разделения анализируемых смесей (в основном, различных красителей) была использована разница в летучести многокомпонентных растворителей. Различие в скорости испарения растворителей в этих условиях и создает градиент. Пластинку при этом помещают в камеру слоем адсорбента вниз над рядом лотков, содержащих систему растворителей с заранее заданным градиентом испарения этих растворителей хроматография горизонтальная адсорбент — силикагель. [c.32] При этом происходит расслаивание многокомпонентной смеси растворителей и опытные пробы поочередно подвергаются воздействию каждого из растворителей. При известной затрате времени можно подобрать наиболее оптимальный состав растворителей и осуществить разделение смеси. [c.33] Различные способы хроматографии в тонких слоях необходимо оценивать с точки зрения их простоты, быстроты выполнения и тех результатов, которые можно с их помощью получить. В этом отношении наибольшей популярностью пользуется метод восходящей хроматографии. Нисходящая хроматография применяется гораздо реже, требует специального устройства, сравнительно сложна, трудоемка и поэтому не имеет каких-либо преимуществ перед восходящей хроматографией. Горизонтальная круговая хроматография используется редко, обычно для быстрого подбора необходимого растворителя. [c.33] Определенный интерес представляет хроматография с непрерывным испарением растворителя. При помощи этого метода удается проводить разделение соединений с весьма близкими значениями Я], метод этот весьма перспективен. [c.33] Вернуться к основной статье