ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Растворители, применяемые в распределительной хроматографии из "Руководство по ионообменной, распределительной и осадочной хроматографии" Часто при помощи одного растворителя не удается разделить сложную смесь. Поэтому используют два растворителя, в которых исследуемые вещества имеют различные коэффициенты распределения. [c.116] Для закрепления бумажного цилиндра и регулирования его диаметра полезно использовать спираль-держатель (см. рис. 17). [c.117] При одновременном получении нескольких двумерных восходящих хроматограмм в четырехугольную герметически закрывающуюся камеру (для этой цели можно использовать аквариум емкостью 10—12 л с притертой крышкой) помещают раму, на которой укрепляют листы фильтровальной бумаги (рис. 25). На дно камеры наливают растворитель. [c.117] Рамку для листов бумаги (рис. 26) изготовляют из алюминия, она состоит из двух четырехугольных пластин, соединенных четырьмя круглыми стержнями. В углах листов фильтровальной бумаги прорезают четыре отверстия. Листы нанизывают на стержни, отделяя друг от друга небольшими кольцами шириной в 2—2,5 см или прищепками. [c.117] Для одновременного получения нескольких нисходящих двумерных хроматограмм могут быть использованы четырехугольные герметически закрывающиеся сосуды с закрепленными в верхней половине сосуда кюветами, в которые наливают органический растворитель и помещают листы бумаги (рис. 27). [c.117] Основание камеры 50x70 см, высота—70 см. Если камера сделана из непрозрачного материала, то на одной из боковых стенок (70x70 см) внизу должно быть сделано стеклянное окошко размером 10 хЗО см. [c.118] Камера должна герметически закрываться крышкой. Для удобства передвижения камера может быть установлена на тележку. [c.119] Хорошие результаты получают при разделении сложной смеси веществ путем сочетания распределительной хроматографии на бумаге с электрофорезом при проведении их одновременно или раздельно. В этом случае, так же как и в двумерной хроматограмме, разделение веществ происходит на бумаге и осуществляется с одной стороны вследствие неодинакового распределения компонентов между двумя несмешивающимися жидкостями, с другой—различного движения компонентов смеси в электрическом поле . [c.119] При одновременном проведении хроматографии и электрофореза бумажные листы пропитывают электролитом и закрепляют между разноименными электродами. Анализируемую смесь наносят на бумагу, электроды подключают к источнику постоянного тока и одновременно на бумагу подают подвижный растворитель в направлении, перпендикулярном направлению силовых линий электрического поля (рис. 28). [c.119] Одновременное проведение хроматографии и электрофореза значительно сокращает время анализа, однако выполнение его связано с некоторыми техническими трудностями кроме того, оба процесса проводятся при одном и том же pH, что не всегда желательно. [c.119] НОЙ кислотой ИЛИ буфером, содержащим уксусную кислоту и пиридин), наносят на нее каплю анализируемой смеси и помещают в электрическое поле (рис. 29). После осуществления э-лектрофорезя бумагу сутпят и переносят в камеру для получения нисходящей или восходящей хроматограммы. [c.120] Метод дальнейшей обработки хроматограмм и их анализ не отличаются от обычных. [c.120] Использование хроматографии на обычной хроматографической бумаге непригодно для анализа сложных смесей различных водонерастворимых веществ (липоидов, жирных кислот, жироподобных витаминов и т. д.) вследствие гидрофильной природы носителя и неподвижного растворителя. [c.120] Гидрофобная бумага поглощает неполярные вещества (керосин, декалин, петролейный эфир), которые применяют в качестве неподвижных растворителей. Разделение веществ этим методом осуществляется вследствие непрерывного перераспределения компонентов смеси между неподвижным растворителем и подвижньш полярным в процессе его движения по бумаге. Подвижными растворителями служат полярные вещества (водные растворы спиртов, кислот и т. д.). В остальном техника получения распределительных бумажных хроматограмм методом обращенных фаз ничем не отличается от техники обычной бумажной хроматографии. [c.121] При колоночном варианте хроматографического разделения методом обращенных фаз в качестве носителей используют следующие гидрофобные вещества кизельгур, стеклянный порошок, полиэтилен. Колоночный вариант метода обращенных фаз все более широко применяют не только для анализа, но и для разделения липопротеидов, эфиров холестерина, водонерастворимых витаминов, различных синтетических высокомолекулярных соединений . [c.121] Преимущества такого способа получения хроматограммы быстрота прохождения подвижного растворителя, возможность проявления хроматограммы реактивами, разрушающими бумагу. [c.121] Как пример можно привести описанный в литературе способ получения тонкого слоя на стеклянной пластинке 28 г очищенного силикагеля растирают с 2 г гипса, к смеси прибавляют 65 мл воды полученную суспензию тщательно перемешивают, наносят на стеклянные пластинки в виде тонких слоев и сушат при 120 °С в течение 2 ч. [c.122] После нанесения исследуемой смеси на пластинку хроматографирование проводят одним из описанных выше способов. [c.122] Чаще всего пластинку помещают горизонтально. На тот край пластинки, где нанесена анализируемая смесь, кладут полоску фильтровальной бумаги, другой конец которой опускают в кювету с подвижным растворителем. Растворитель вследствие капиллярных сил поднимается по бумаге и смачивает пластинку с носителем, при этом происходит разделение смеси на компоненты. [c.122] Обычно хроматографирование осуществляется в течение 10— 30 мин. Последующее проявление и методика анализа такие же, как и в бумажной распределительной хроматографии. [c.122] Вернуться к основной статье