ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кинетика ферментативного катализа из "Введение в молекулярную биологию" Так как ферменты — катализаторы определенных химических реакций, то следует количественно изучать их по влиянию на кинетику соответствующей реакции. Для получения сколько-нибудь ясных и новторимых результатов необходимо пользоваться высокоочищенньши, в частности кристаллическими, препаратами ферментов. Сама по себе ферментативная реакция изучается на чистой системе, состоящей из буфера, субстрата (или субстратов) и фермента. Следует всегда помнить, что подобный модельный эксперимент весьма далек от обстановки, в которой ферменты действуют в клетке. В клетке ферменты часто включены в форменные образования, или в так называемую структуру . Одно время полагали, что, измеряя кинетику реакции в присутствии добавки чистого кристаллизованного фермента, мы выясняем максимальную каталитическую активность, на которую способен данный белок. На самом деле это может быть и неверно. Вполне возможно, что, будучи включен в форменные элементы, фермент усиливает свое действие, так как может произойти благоприятное изменение его вторичной и третичной структуры. [c.155] Для нахождения обеих констант Михаэлиса пользуются обычно простым графическим построением, которое приписывается часто Лайнуиверу и Бэрку, хотя оно и было известно задолго до них (по-видимому, введено в обиход Холдейном). [c.158] Однако этот способ изучения ферментов является ненадежным, так как здесь выступают на передний план осложнения, которых мы еще не касались. Дело в том, что продукт реакции имеет. [c.158] В большинстве случаев величина е оказывается порядка 10 —10 , так как энтропия в активированном состоянии мало понижается. Это обстоятельство играет не меньшую роль, чем низкая энергия активации, и способствует тому, что фермент . оказываются столь мощными катализаторами, если их сравнивать с обычным . [c.164] Здесь же следует подчеркнуть, что, исследуя ферментативную кинетику как функцию различных факторов, нужно стремиться изучить обе константы Мпхаэлпса, так как они описывают разные стороны каталитического процесса. [c.165] Изменение копстанты связыва 1ия для фермента аргиназы как функции pH. [c.165] НООС-СН—( Ho)з-NH2 + КНг-С-КН,. [c.165] Выше мы уже касались механизма ряда энзиматических реакций. Основной подход заключался в том, чтобы понять, какие функциональные группы входят в состав активного центра. Как уже говорилось, действие фермента всегда может быть сведено к разрыву двух химических связей между парами атомов АВ и СО и к образованию новых связей АВ СО — ЛС+50. [c.167] Ослабление связей в молекулах субстратов облегчает перегруппировку ОН +СОз НСО я. [c.169] Все ферменты, содержащие металлы, подвергаются отравлению различными комплексообразующими реагентами. По карт1ше отравления судят обычно о том, какой именно металл содержится в белке. Следует помнить, однако, что константа устойчивости комплекса металла со специфическим реагентом, измеренная в растворе ионов металла, не дает количественной характеристики связывания металла, входящего в состав фермента с тем же реагентом. [c.169] Вернуться к основной статье