ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Качественный и количественный анализ хроматограмм из "Практикум по хроматографическому анализу" С помощью регистрирующих приборов — самописцев, которые измеряют и автоматически записывают последовательность сигналов детектора, получают кривую вымывания компонентов разделяемой смеси, называемую хроматограммой. Иногда вместо детектора или наряду с ним используют приборы, позволяющие определить не только концентрацию компонентов, но и их природу. К таким приборам относятся инфракрасный и ультрафиолетовый спектрографы. [c.60] Полученные данные сравнивают с табличными данными и, таким образом, определяют состав смеси. [c.61] В табл. 1 приведены удерживаемые объемы некоторых углеводородов относительно нормального пентана при определенных условиях. [c.61] Как видно из табл. 1, удерживаемые объемы увеличиваются с ростом молекулярного веса углеводорода, для непредельных соединений удерживаемые объемы меньше, чем для предельных. При идентификации компонентов сложных смесей анализ проводят на параллельных или последовательно соединенных колонках с сорбентами различной полярности. [c.61] Кроме качественного анализа, хроматограммы позволяют производить и количественный анализ. Элюцион-ные кривые представляют собой количественные данные процесса разделения. [c.62] При интегральном детектировании фиксируется общее количество компонента, поэтому расшифровка хроматограмм не представляет трудностей. Например, содержание кислот в смеси определяют прямым титрованием, а при использовании в качестве газа-носителя двуокиси углерода объемы фракций суммируются в азото-метре (газ-носитель поглощается раствором щелочи). Более чувствительным является дифференциальное детектирование, нашедшее большее распространение, при этом фиксируется лишь изменение некоторого свойства газа-носителя и поэтому не представляется возможным непосредственно судить об объеме фракций в сложной смеси. Поэтому для количественных определений в этом случае необходимо знать зависимость величины отклонений показаний самописца или прибора-индикатора от концентрации компонента в смеси. [c.62] Результаты хроматографирования смеси используются для количественного определения компонентов. При этом имеют значение параметры хроматографического пика высота /г и к, ширина пика ро,5, площадь пика 5 (площадь, ограниченная контуром пика и нулевой линией), отрезки /о и /ь соответствующие времени удерживания неадсорбирующегося газа и удерживаемому объему компонента. [c.62] Для целей количественного анализа проводится предварительная калибровка, заключающаяся в определении зависимости между известным количеством введенного в колонку вещества и площадью или высотой пика на хроматограмме (обычно линейная зависимость). Для построения калибровочной кривой используют чистые индивидуальные вещества [10, 12, 13, 15, 18—20, 24—28]. [c.62] По методу абсолютной калибровки — количество компонента в пробе определяют по калибровочному графику зависимости площади пика или высоты пика от дозируемого количества вещества. Для такой калибровки необходимо использовать чистые вещества. Применение микрометрических шприцев для введения в колонку точного количества исследуемой смеси, а также жесткое соблюдение режима работы колонки при калибровке и измерениях являются обязательными условиями данного метода. [c.63] Методом абсолютной калибровки чаще всего пользуются в том случае, когда определяют не все компоненты анализируемой смеси, а требуется определить только один или два составляющих компонента. Этот метод используют и при определениях микропримесей. Он позволяет рассчитать хроматограмму сложной смеси даже при неполном разделении пиков. [c.63] Метод внутреннего стандарта основан иа добавление известного количества определенного вещества, называемого внутренним стандартом . Стандарт не должен реагировать с компонентами пробы. При анализе смеси гомологов стандарт должен быть членом этого гомологического ряда. Время удерживания стандарта должно быть равно среднему времени удерживания компонентов смеси.. Для количественного определения содержания компонентов в смеси строят калибровочные графики. [c.64] Построение калибровочных кривых на основе внутреннего стандарта. Предварительно готовят жидкие смеси с точным содержанием отдельных компонентов и вещества, принятого за стандарт. Определенную часть смеси вводят в газовую пипетку, испаряют, отбирают пробу паров микрошприцем, вводят ее в колонку. [c.64] При построении калибровочного графика по оси ординат откладывают отношения площадей (или высот) пиков определяемого вещества и внутреннего стандарта, а по оси абсцисс — отношения весовых количеств (или процентных содержаний) обоих веществ. Такой график строится на основании хроматограмм ряда смесей, содержащих различные количества калибруемого компонента. Если затем в процессе анализа определенное количество внутреннего стандарта добавляется к неизвестной пробе, содержащей компоненты, для которых были построены калибровочные графики, то из полученной хроматограммы, определив соотношение площадей или высот искомого компонента и внутреннего стандарта, по калибровочному графику можно определить концентрацию искомого компонента. [c.64] При расчетах можно пользоваться и высотами пиков, построив соответствующие калибровочные графики. [c.65] Метод внутреннего стандарта получил большое распространение в практике газовой хроматографии. При использовании этого метода калибровки нет необходимости определять точно величину анализируемой пробы, исключается также влияние изменения скорости газа-носителя и температуры колонок. Однако этот метод применяется только в том случае, когда необходимо определить не все компоненты смеси. [c.65] Метод нормализации основан на том, что сумма площадей всех пиков на хроматограмме с учетом соответствующих поправочных коэффициентов принимается за 100%, а площадь каждого пика составляет определенную часть от суммы площадей всех пиков. Предварительно определяют поправочные коэффициенты, нужные для пересчета показаний детектора на концентрацию разделенных веществ. [c.65] В каждом отдельном случае, прежде чем остановиться на каком-либо варианте проведения эксперимента, следует ясно представить себе цель и задачи опыта и требуемую точность анализа (14, 26—29]. [c.65] Вернуться к основной статье