ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Углеводы из "Хроматографических анализ" Общим правилом при хроматографировании сахаров как на активированном угле, так и на полярных сорбентах является возрастание адсорбируемости от моноз к биозам и, далее, к триозам. [c.144] Хроматографическая адсорбция может быть применена для разделения глюкозы и сахарозы, а ионный обмен—для очистки фруктозы . В качестве адсорбента употребляется уголь, а в качестве растворителя и проявителя—этиловый спирт. [c.144] Сахара при взаимодействии с азобензол-4-карбоксихлоридом образуют окрашенные эфиры. При хроматографировании смеси таких эфиров (например, азобензол-4-карбоксилатов глюкозы и фруктозы) на колонке получаются окрашенные полосы. [c.144] Ацетилцеллюлозу можно разделить на несколько фракций, содержащих молекулы различной степени полимеризации. В качестве адсорбента применяют уголь, растворителем служит ацетон промывку производят диоксаном. Степень полимеризации ацетилцеллюлозы связана с определенной величиной вязкости ее раствора. Исследование показало, что менее вязкие фракции адсорбируются в верхней части колонки, а более вязкие фракции проходят в фильтрат. [c.144] Для разделения полисахаридов (а и -амилозы) используют в качестве адсорбента вату. [c.144] Ковальский исследовал гликоген методом хроматографической адсорбции на углекислом кальции. Этим путем он достиг разделения гликогена печени и мышц кролика, собаки, свиньи, морской свинки, белой крысы и лягушки. X. С. Коштоянц и 3. А. Янсон использовали этот метод для подтверждения факта нервнотрофического влияния на обмен веществ в мышцах. [c.144] При хроматографировании углеводов на бумаге в качестве подвижных растворителей применяют фенол, коллидин, н-бутиловый спирт, изомасляную кислоту, а также тройные и четверные смеси уксусной кислоты и воды, нормального бутанола, этанола, воды и аммиака. [c.144] Пятна ди- и трисахаридов делаются видимыми при обработке специальными составами, например 0,2 %-ным (по объему) раствором нафторезорцина в этиловом спирте и 0,2 %-ным (по объему) раствором трихлоруксусной кислоты в воде, которые в равных объемах смешивают непосредственно перед употреблением фруктоза, сорбоза, сахароза и раффиноза окрашиваются в яркокрасный цвет, другие сахара окрашиваются очень слабо. [c.145] После нагревания до 70—80° во влажной атмосфере, при действии этого реактива в присутствии пентоз и уроновой кислоты, обр зуются голубые пятна. Кетозы при этих условиях дают оранжево-коричневые окраски. Специфические цветные реакции, с сахарами дают также фенол в смеси с 2 н. соляной кислотой, флороглюцин, орсин, а-нафтол, резорцин и нафторезорцин. Резорцин и нафторезорцин широко применяют для определения глюкозы, галактозы, манозы, фруктозы, ксилозы, арабинозы и рамнозы. [c.145] В последнее время для проявления хроматограмм сахаров В. С. Асатиани рекомендован хорошо сохраняющийся реактив, который представляет собой водный раствор, содержащий 0,5% 3,Ь-динитросалициловой кислоты и 4% едкого натра. При опрыскивании этим реактивом бумажной хроматограммы редуцирующие сахара дают четкие коричневые пятна на бледножелтом фоне. [c.145] Другой метод качественного анализа хроматограмм смесей сахаров на бумаге основан на образовании флуоресцирующих веществ при взаимодействии сахаров с Л -фенилендиамином . Хроматограмму на бумаге после разделения сахаров высушивают при температуре 105°или на воздухе, опрыскивают 0,2 н. раствором дихлоргидрата Jи-фeнилeндиaминa в 76%-ном этиловом спирте и нагревают 5 мин. при 105° затем облучают ртутной лампой и наблюдают флуоресценцию. Чувствительность 10 сахара. [c.145] Такие сахара, как арабиноза, ксилоза, рибоза, дают яркую оранжево-желтую флуоресценцию фyiioзa, рамноза, глюкоза, галактоза, манноза, фруктоза и сорбоза дают желтую флуоресценцию различной интенсивности галактуроновая кислота, глюкоз-амины, мальтоза и лактоза дают заметную, но слабую флуорес- ценцию. Очень слабо флуоресцирует аскорбиновая кислота инозит и сорбит не флуоресцируют. В качестве растворителей употребляют смесь (по объему) 1 ч. пиридина, 1,5 ч. воды и 3 ч. н-бутилового спирта. [c.145] Полисахариды и другие сложные углеводороды также анализируют методом хроматографии на бумаге. Для количественного анализа хроматографических фракций сахаров применяют титрование, колориметрию и другие методы определения. [c.145] Изучение сложных смесей, получаемых при гидролизе полисахаридов, сильно облегчается применением распределительной хроматографии. Таким путем было проведено исследование льняной слизи, где были найдены галактоза, арабиноза, ксилоза, рамноза и следы рнбозы и фруктозы. [c.146] М Шемякин и О. С. Лобахина предложили хроматографический метод микроопределения глюкозы, основанный на хроматографировании на бумаге с проявлением медноамиачны.м раствором. Получаются ярко светящиеся люминесцентные хроматограммы (полосы—желтые и коричневые.) Предложенный метод позволяет открывать сахар в моче диабетиков. [c.146] Вернуться к основной статье