ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Каротиноиды из "Хроматографических анализ" Хроматографический анализ каротиноидов впервые проведен М. С. Цветом одновременно с изучением хлорофилла. Особенностью каротиноидов является способность их растворяться в жирах. Некоторые каратиноиды близки по строению к витаминам и являются чрезвычайно лабильными пигментами поэтому обычные методы выделения к ним неприменимы. Между тем многие каротиноиды входят в состав сложных и трудно разделимых смесей. Вследствие этого хроматографический метод их выделения является в настоящее время единственным . [c.179] Величина адсорбционной способности каротиноидов обусловлена наличием системы сопряженных двойных связей в их молекулах, содержащих длинные алифатические цепи со многими боковыми метильными группами (например, -каротин содержит 11 сопряженных двойных связей и 4 боковые метильные группы в цепи). [c.179] Желтая или красная окраска, присущая этим соединениям, также зависит от наличия системы сопряженных двойных связей. [c.179] Вследствие большого количества каротиноидных пигментов и их большого сходства часто бывает целесообразно перед разделением на колонке до и после омыления распределит , их между различными несмешивающимися растворителями. Сходные по свойствам каротиноиды сосредоточиваются в одном из растворителей, что и приводит к их разделению. [c.180] Каротины, выделенные из адсорбционной колонки путем вымывания, сравниваются с чистыми пигментами, полученными другим путем. Сравнение может быть проведено в трех отдельных колонках получением смешанной хроматограммы или определением спектров поглощения и коэффициентов адсорбции. Наконец, устанавливают химический состав и число двойных связей в молекуле пигмента. [c.181] Процесс адсорбции и вымывания из колонки часто сопроволс-дается значительной потерей каротиноидов. Это зависит от применяемых адсорбентов, растворителей, времени пребывания на адсорбенте, адсорбции посторонних веществ и от других условий. Вследствие лабильности каротиноидов часть их за время адсорбции успевает разрушиться. Каротиноиды легко изомеризуются под действием кислот, галоидов, нагревания и некоторых адсорбентов. Быстрая изомеризация каротиноидов наблюдается при действии на них раствора амида калия в жидком аммиаке. [c.181] Применяют также кальцинированную соду, окись магния и сернокислый кальций. В качестве растворителя лучше всего применять петролейный эфир или дихлорэтан. При условиях разделения в больших масштабах на 1 кг высушенных и растертых в порошок листьев растения расходуется 5,5 л дихлорэтана. Вытяжку упаривают до объема 100 мл и пропускают через колонку размером 22X6,6 см, наполненную смесью окиси магния и разбавителя (1 1). [c.181] При промывании колонки чистым дихлорэтаном каротины переходят в фильтрат. Для ускорения выделения каротинов 1 г сухих листьев, измельченных в порошок, насыпают непосредственно на колонку адсорбента и заливают растворителем. Извлечение и выделение каротина происходит в течение одной операции. Применение в качестве адсорбента кальцинированной соды для извлечения каротинов из сухих измельченных в порошок листьев петролейным эфиром весьма удобно, так как адсорбент обладает хорошей избирательной способностью, а каротин не разлагается и не загрязняется окрашенными продуктами других пигментов, содержащихся в листьях. [c.181] Количественное определение каротина в фильтрате проводят колориметрически. [c.181] Уже Цвет считал возможным, что каротин листа отнюдь не индивидуальное вещество, но смесь двух или нескольких гомологов, которые можно разделить с помощью соответственных адсорбентов. [c.182] В 1931 г. Кун, Ледерер и Винтерштейи весьма успешно применили хроматографическую адсорбцию для исследования каротинов. В результате при помощи хроматографической адсорбции каротин был разделен на три изомера—а-, и -(-каротины . [c.182] Михайловина и Б. Г. Савинов 51 исследовали вопрос об устойчивости каротина по отношению к щелочам путем хроматографического анализа растворов а- и 3-каротинов в бензоле, на колонках из окиси алюминия и гидрата окиси кальция. [c.182] Савинов и Г. М. Лущевская 54 предложили упрощенный метод хроматографического определения каротина в зеленых растениях. Б, Г. Савинов Г, С. Третьякова155 изучали димеризацию каротина при бромировании, применив адсорбцию на активированном сульфиде магния из бензинового раствора, а также на окиси магния и окиси алюминия. [c.183] Для идентификации отдельных каротиноидов удобнее всего применять спектроскопический метод, как это было предложено еще М. С. Цветом при разделении хлорофиллинов и каротиноидов. [c.183] Ниже приводится краткая сводка, иллюстрирующая многообразие применений метода хроматографической адсорбции к исследованию каротиноидов. [c.184] О применении хроматографического метода для разделения цис-транс-изомеров каротиноидов см. стр. 135. [c.184] Вернуться к основной статье