ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение численности микроорганизмов из "Микробиология" При работе с чистыми культурами определение количества микроорганизмов не вызывает сложностей. Другое дело, когда надо определить число микроорганизмов в природных образцах, поскольку микроорганизмы в них чрезвычайно разнообразны. Методы, применяемые для подсчета вирусов, бактерий, грибов, водорослей и простейших, различны. Специальную технику применяют для подсчета психрофилов и строго анаэробных форм. [c.257] Существует два метода подсчета микроорганизмов 1) прямой счет клеток под микроскопом и 2) непрямой подсчет после подращивания на твердых средах (учет живых клеток). Чаще используют первый метод, при этом обычно не различая живые и мертвые клетки (по Виноградскому). Метод можно модифицировать с применением эпифлуоресцентного микроскопа и флуоресцирующих дифференциальных красителей для подсчета живых и мертвых клеток в препарате. Клетки микроорганизмов можно подсчитывать также в определенном объеме жидкой пробы под световым микроскопом (камеры Тома —Горяева, Петрова —Хаузера). [c.257] Иногда для определения скорости роста клеток применяют метод подсчета делящихся клеток, причем было показано, что этот метод коррелирует со скоростью синтеза РНК, измеренной по включению меченого аденина. [c.257] При учете живых микроорганизмов после подращивания применяют в основном два метода 1) подсчет на чашках выросших колоний после соответствующих разведений и 2) учет по методу предельных разведений. Оба метода требуют разделения микроорганизмов перед посевом на индивидуальные клетки, которые затем дают потомство. Применение методов подсчета с посевами требует бережного обращения с пробами для сохранения жизнеспособных клеток. Следует учитывать, что для подсчета микроорганизмов различных групп необходимо применять разные среды, которых разработано более тысячи для выявления бактерий, архей, грибов, водорослей, простейших, как аэробов, так и анаэробов. [c.258] Для выявления отдельных групп микроорганизмов применяют селективные и диагностические среды, среды с антибиотиками, специфически подавляющими развитие отдельных групп микробов. [c.258] Модификацией метода служит гибридизация колоний, при которой из тысяч колоний, выросших на чашке, можно выявить одну, специфически гибридизирующуюся с выбранным геном-маркером. Метод позволяет подсчитать число микроорганизмов нужного вида или с необходимой функцией (в зависимости от примененного гена для гибридизации) среди большого количества сопутствующей микробиоты из природных проб. [c.258] Вернуться к основной статье