Определение численности микроорганизмов

При определении численности микроорганизмов в воздухе в пробирку с 10 мл стерильной водопроводной воды пропускают определенный объем воздуха. Для этого пробирка с водой закрывается стерильной пробкой с двумя стеклянными трубками. Одна трубка, сообщающаяся с воздухом, опускается в воду до дна пробирки, а другая трубка, соединенная с аспиратором, оканчивается сразу под пробкой. По количеству воды (в л), выпущенной из аспиратора, устанавливают объем воздуха, прошедшего через стерильную воду в пробирке. При прохождении воздуха через воду бактерии остаются в воде. Их численность затем определяют так же, как и в воде, после приготовления соответствующих разведений методом питательных пластин, или последующей фильтрацией через мембранные фильтры, подсчитав число зародышей на чашке или на мембранных фильтрах. Зная объем воздуха, прошедшего через воду, делают потом пересчет численности бактерий на [c.76]

Определение численности микроорганизмов [c.257]

Подсчет клеток на мембранных фильтрах. Этот метод рекомендуется использовать для определения численности микроорганизмов в субстратах с низкой плотностью клеток. Его применяют при определении количества микроорганизмов в различных водоемах, при санитарно-бактериологических и некоторых других [c.120]

В связи с большой гетерогенностью состава почвы для учета численности микроорганизмов в ней с исследуемого участка берут среднюю почвенную пробу (стр. 146). Пробу берут стерильным буром, стерильной лопатой и стерильным ножом в заранее подготовленные стерильные полиэтиленовые, пергаментные мешки или в стерильные широкогорлые банки, закрывающиеся корковыми пробками, обернутыми ватой. Бур, лопату и нож стерилизуют (фламбированием) в поле перед взятием образца. Тщательно отмытые предметы обжигают горящим спиртом и неоднократно погружают в почву. На мешок или банку наклеивают этикетку с указанием места взятия образца, горизонта, даты. До анализа и между определениями пробы хранят в холодильнике. [c.66]

Для определения численности бактерий в воздухе можно использовать более простой, но менее точный метод Коха (осаждением зародышей микроорганизмов на плотных питательных средах). Суть его сводится к следующему. Стерильные чашки Петри с питательной средой (МПА, МПЖ или кусок вареной картофелины) [c.76]

Порядок отбора, хранения и транспортирования проб воды такой же, как и для прочих санитарно-микробиологических исследований, однако в случаях крайней необходимости пробы для определения общей численности микроорганизмов можно хранить более длительно, зафиксировав формалином (1 мл на 50 мл исследуемой воды). Отбирать пробу можно в нестерильную, но чисто вымытую посуду. [c.79]

Определение количества клеток высевом на плотные питательные среды (чашечный метод Коха). Метод широко применяют для определения численности жизнеспособных клеток в различных естественных субстратах и в лабораторных культурах. В его основе лежит принцип Коха, согласно которому каждая колония является потомством одной клетки. Это позволяет на основании числа колоний, выросших после посева на плотную питательную среду определенного объема исследуемой суспензии, судить об исходном содержании в ней клеток микроорганизмов. Результаты количественного учета микроорганизмов, проведенного методом Коха, часто выражают не в числе клеток, а в услов- ных единицах — так называемых колониеобразующих единицах (КОЕ). [c.122]

Иногда клеток так много, что развившиеся колонии микроорганизмов сливаются, что часто наблюдается в чашках при разведении 10-2. При высоких разведениях вырастают единичные колонии (меньше десяти), которые могут образоваться от случайно попавших клеток из воздуха, при внесении в чашку суспензий или питательной среды. Учет таких чашек сделает подсчет недостоверным. Для правильного определения численности клеток подсчитывают только такие чашки, в которых колоний свыше десяти и не более 250...300 (в последнем случае при условии, если колонии очень мелкие). [c.49]

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЧИСЛЕННОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ГРУПП МИКРООРГАНИЗМОВ [c.104]

Определение общей численности микроорганизмов в почве прямым подсчетом под микроскопом. Этим способом наиболее точно устанавливают численность зародышей в почве. Он стал возможным после того, как американский микробиолог Конн предложил применять для окрашивания почвенной суспензии кислые красители, хорошо прокрашивающие вегетативные клетки микроорганизмов и слабо -почвенные частицы. [c.112]

Наиболее полно отражает численность клеток в почве метод прямого подсчета под микроскопом, требующий высокой квалификации исследователя. Для подсчета зародышей методом Виноградского в модификации Шульгиной на предметное стекло наносят определенный объем суспензии, готовят из него мазок на определенной площади, затем мазок фиксируют, красят и подсчитывают под микроскопом количество клеток микроорганизмов. Фиксация препарата не дает возможности выявить- количество жизнеспособных клеток. В какой-то мере этот недостаток можно устранить при использовании метода флуоресцентной микроскопии. [c.141]

Для определения качественного состава микрофлоры зерна колонии группируют по культуральным признакам, из каждой группы колоний готовят препараты, выявляют принадлежность микроорганизмов к роду или семейству и определяют численность бактерий каждой группы в процентах от общего количества микроорганизмов. [c.192]

При трактовке значения численности сапрофитов в водоемах, где этот показатель не нормируется, определяют микроорганизмы при температуре инкубации 37°С через 24 ч и при 20—22°С через 48 ч. Первая группа более показательна при оценке степени фекального загрязнения, а вторая — более широкая — при изучении процессов самоочищения. Одновременное определение этих двух групп сапрофитов дополняет санитарную характеристику водоемов при посевах чистых вод образуется значительно меньше колоний при 37°С, чем при 20—22°С, а при анализе хозяйственно-фекальных сточных вод количество колоний при той или другой температуре — близко. Однако сезонный фактор влияет па это соотношение в летний период разница в показателях уменьшается, а в зимний увеличивается. [c.12]

Микробиологическое изучение любой системы, использующей активный ил, включает 1) идентификацию микроорганизмов и определение их численности 2) оценку микробиологической активности как популяции в целом, так и отдельных видов 3) оценку соотношения между (1) и (2), с одной стороны, и количеством вводимых питательных веществ и продуктов переработки — с другой. [c.253]

По результатам гидробиологического анализа определяется режим работы сооружения, нагрузка по органическим веществам, устанавливается факт попадания производственных сточных вод, содержащих токсичные вещества. При характеристике работы сооружения следует учитывать интенсивность развития индикаторных форм микроорганизмов, а не отдельных видов. Анализ кривых роста для бактерий и других микроорганизмов показывает, какие микроорганизмы сопутствуют определенной фазе развития бактериальной микрофлоры активного ила. Так, фаза задержки роста бактерий в активном иле сочетается с преобладанием в нем амеб и жгутиковых. В логарифмической фазе из простейших наибольшее развитие получают жгутиковые, увеличивается количество свободно плавающих инфузорий. Эта фаза соответствует интенсивному разложению органических примесей, но скоплений бактерий не образуется. В фазе замедленного роста и стационарной фазе количество бактерий почти не изменяется, но идет образование хлопка активного ила. Этой фазе соответствует максимум развития свободноплавающих инфузорий. Фаза отмирания бактерий (эндогенная) соответствует окончанию разложения органического вещества. Численность бактерий уменьшается в результате отмирания из-за недостатка питательных веществ и потребления их простейшими. В этой фазе из простейших преобладают прикрепленные инфузории, присутствуют свободноплавающие и коловратки. Окисление клеточного материала отмирающих бактерий идет параллельно с процессом нитрификации (нитрифицирующий ил). Роль простейших сводится к поеданию бактерий, а также к потреблению взвешенных веществ. [c.266]

Так, например, Н. Бейли [23], считая, что стохастическая модель более полно может учесть особенности поведения биологического объекта (в первую очередь его изменчивость) пытался описать рост популяции микроорганизмов как изменение распределения вероятностей численности особей в каждый данный момент времени. Оценивая факт деления клетки как случайное событие, характеризуемое определенной вероятностью, автор выразил изменение численности популяции через величину математического ожидания. Для случая большого числа особей выраже- [c.21]

Основные закономерности внешнего поведения популяции микроорганизмов были отмечены еще в конце XIX в. уже после первых попыток графического представления изменения численности растущей популяции микроорганизмов во времени. С тех пор в большинстве публикаций, посвященных исследованию различных аспектов микробиологии, в том или ином виде приводятся кинетические кривые роста. Для их построения используются результаты измерений концентрации биомассы растущей популяции, проводимых с использованием прямых и косвенных методов [31—33]. К прямым методам относится непосредственный подсчет живых и мертвых микроорганизмов, метод высева на чашки, а также определение сухого веса биомассы. Вторая группа методов основана на учете тех свойств культуры, которые с определенным основанием можно считать пропорциональными количеству присутствующих в пробе микроорганизмов (турбидиметрия, светорассеяние, определение количества накапливающихся в культуре продуктов метаболизма, а также оценка концентрации некоторых компонентов клеток, например ДНК). Во [c.30]

Прогрессивно возрастающее замедление роста популяции приводит в конце концов к остановке прироста численности и стабилизации количества микроорганизмов на определенном уровне. Формально это состояние популяции можно охарактеризовать или бесконечно большой величиной времени удвоения клеток, или, что то же самое, нулевым значением скорости роста. [c.42]

Наличие связи между численностью микроорганизмов и величиной окислительного потенциала (окислительного напряжения) представляет известные перспективы для разработки ускоренного метода определения численности микроорганизмов путем колориметрического измерения величины окислительного потенциала. С другой стороны, различие в ходе кривых фаголизиса и бактериостаза культуры золотистого стафилококка создает предпосылки для дифференцирования лизиса от бактериостаза путем колориметрического измерения потенциала. Опыты, проведенные на бульоне Хоттингера и на мясопептонном бульоне с глюкозой, показали, что при наличии пенициллина пробирки с культурой и метиленовым синим остаются окрашенными и прозрачными, при фаголизисе содержимое пробирок, оставаясь прозрачным, частично обесцвечивалось, содержимое же контрольных пробирок обесцвёчивалось полностью, оставаясь мутным. Таким образом, содержимое пробирок культуры золотистого стафилококка, подвергнутых бактериостазу, фаголизису, или же контрольных различалось либо по прозрачности, либо по мутности. [c.101]

Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках (метод Виноградского—Брида). Метод широко используется для определения численности микроорганизмов в различных естественных субстратах — почве, загрязненных водах, молоке, в оптически непрозрачных питательных средах, содержащих нерастворимые в воде компоненты, например, крахмал, соевую муку. Преимущество метода заключается также в том, что фиксированные окрашенные препараты хорошо сохраняются, поэтому подсчет можно проводить в удобное для исследователя время. [c.119]

Учет на жидких средах. При определении численности микроорганизмов на этих средах отмечают крестом пробирки с разведением, в которых развились представители данной группы. Затем для более точного подсчета используют таблицу Мак-Креди, составленную на основании обработки многочисленных результатов методом вариационной статистики. В соответствии с требованиями, предъявляемыми при расчете, необходимо составить числовую характеристику из трех цифр (табл. 2). [c.107]

При осуществлении текущего санитарного надзора рекомендуется сокращенный анализ. Он включает определение ОМЧ, БГКП, титра строгих анаэробов, термофильных бактерий, нитрифицирующих бактерий. В полный санитарно-микробиологический анализ дополнительно входят определение численности и процентного отношения спор к общему количеству микроорганизмов, количество актиномицетов, грибов, целлюлозоразрушающих микроорганизмов и аммонификаторов, основных групп почвенного микробиоценоза и ряд дополнительных исследований (например, токсичность почв для микроорганизмов). По эпидемическим показаниям в ходе исследований проводят обнаружение патогенных микроорганизмов (табл. 11.2). [c.421]

По данным Рубенчика, черный ил содержит большое количество бактерий. Их численность доходит до 3 млрд. на 1 г ила (нри учете прямым методом). Деятельность определенных групп микроорганизмов приводит к образованию лечебной грязи. В том, что черный ил является микробиогенным продуктом, можно легко убедиться на опыте. Простерилизованная суспензия 1 лины с водой, содержащая органические вещества, может храниться без заметных внешних изменений весьма длительное время. Если же в эту среду в качестве микробнох зах васки [c.530]

Для определения численных значений коэффициентов мета-болиз.ма, дающих количественную характеристику процессов метаболизма популяции и отражающих особенности физиологии культивируе.мого микроорганизма, целесообразно дифференциальное уравнение скорости ассимиляции привести к линейному виду. Разделив обе части уравнения (3.32) на X, после группировки членов получаем [c.226]

В начале лагфазы нет видимого изменения численности микроорганизмов и заметного потребления питательных веществ. Од-яако это не говорит еще о полном застое внутри микробных клеток лроисходят определенные структурно-функциональные перестройки, подготавливающие их к началу активного роста и физиологической деятельности. В результате в середине лагфазы клетки оказываются омоложенными, начинают активнее ды- сс 1S" I // III [c.275]

Природоведческая микробиология требует понимания условий, в которых микроорганизмы взаимодействуют с природой, а это понимание, в свою очередь, должно опираться на науки о Земле, прежде всего на знание географической оболочки. Центральное географическое понятие здесь - ландшафт. Абстрактная характеристика среды обитания организмов носит название экосистемы и чаще всего употребляется экологами. В экологии микроорганизмов употребляются два понятия аутэкология, описывающая поведение отдельного вида в среде обитания, и синэкология, относящаяся к сообществу или экосистеме. Местообитание организмов называется биотопом, а сумма организмов, обитающих в нем, биоценозом. Для макроорганизмов эти понятия хорошо разработаны на основе определения биоразнообразия как флористического или фаунистическо-го описания и на основе определения численности видов. В основу современного понимания биоразнообразия положено понятие экосистемы . В микробиологии термины биотоп и биоценоз употребляются крайне редко. У микробиологов флористические описания сейчас заменены перечислением генетических клонов, получаемых методами молекулярной биологии. Однако главная особенность микробиологии, в отличие, например, от зоологии, состоит в том, что бактерии являются мощными геохимическими агентами и взаимодействуют с геосферой. Поэтому для микробиологов определяющим условия обитания микробиоты является геохимия ландшафта. [c.19]

Выращивание в толще плотной среды. Этим приемом пользуются для получения изолированных колоний при выделении чистых культур или определении численности анаэробных микроорганизмов. Посевной материал вносят в расплавленную и остуженную до 48—50° агаризованную, желательно осветленную среду, тщательно перемешивают и оставляют в пробирках или переливают стерильной пипеткой в заранее простерилизованные трубки Бурри или чашки Петри. Поверхность среды в пробирках заливают парафином. Трубки Бурри — это стеклянные трубки длиной 20—25 см, диаметром 1,0—1,5 см. Трубки стерилизуют, закрыв оба конца ватными пробками. Перед посевом ватную пробку у одного конца заменяют стерильной резиновой, через другой конец трубки вносят среду с посевным материалом и закрывают также резиновой пробкой (рис. 38). [c.60]

Для определения количества клеток анаэробных микроорганизмов чашки Петри с плотной средой после посева помещают в анаэростаты. Иногда для определения численности анаэробов плотную среду после засева оставляют в пробирках. Поверхность застывшей среды заливают парафином. Для лучшего рассмотрения колоний микроорганизмов среды в этом случае рекомендуется осветлять. Определение численности экстремальных анаэробов требует применения техники Хангейта (см. гл. 4). [c.124]

Несмотря на огромный материал по микроэлементному составу почв, приходится признать, что достаточно надежных, общепризнанных экологических нормативов, позволяющих оценить загрязненность почв различными микроэлементами, до настоящего времени не существует. Неоднократно высказывалось мнение, что не может существовать единых ПДК для всех типов почв и любых биогеохимических ситуаций [Обухов и др., 1980 Воробейчик и др., 1994]. Действующие в настоящее время гигиенические ПДК д я почв разработаны лишь для ограниченного круга элементов. При их обосновании учитывались отрицательные изменения численности микроорганизмов в почвах при повышенных концентрациях химических веществ, показатели биологической акти1вности почвы, концентрации в сельскохозяйственных растениях на определенной территории. Однако типологическое многообразие почв других ландшафтных зон и субрегионов биосферы со свойственной им спецификой химического состава определяет разнообразие ответных реакций на изменение содержания того или иного элемента. Те [c.46]

Учет численности бактерий в воздухе. При определении числа микроорганизмов в воздухе через пробирку с 10 мл стерильной водопроводной воды пропускают определенный объем воздуха. Для этого ее закрывают стерильной пробкой с двумя стеклянными трубками. Одну трубку, сообш,аюш.уюся с воздухом, опускают в воду до дна пробирки, а отверстие другой, соединенной с аспиратором, находится сразу под пробкой. По количеству воды (в литрах), выпуш.енной из аспиратора, устанавливают объем воздуха, прошедшего через стерильную воду в пробирке. [c.51]

С. Н. Виноградский установил, что разные почвенные фракции содержат неодинаковое количество микроорганизмов. Для более точного определения их численности в почве он предложил из почвенной суспензии готовить несколько фракций. Из каждой фракции, согласно его методу, приготовляют препарат на площади 1 см . Ма аналитических весах устанавливают точную массу высушенного препарата (предварительно взве-шивaюt на этих весах чистое стекло) и после фиксации окрашивают эритрозином в феноловой воде. [c.160]

Приведенные результаты позволяют заключить, что ведущую роль в процессах анаэробного разложения органического материала играют облигатные анаэробные бактерии. Однако систематическое выявление в содержимом метантенков аэробов и факультативных анаэробов свидетельствуют о том, что эти микроорганизмы также участвуют в деструкции органических веществ, и при определенных условиях численность их может существенно возрастать. Так, при добавлении к ферментируемой жидкости глюкозы количество аэробных и факультативно анаэробных бактерий повышается от 1 X 10 до 3,2 X 10 клеток/мл (цит. по [404]). [c.138]

Спорообразующие бактерии рассматриваются нами как определенная экологическая группировка, состо.ящая из значительного количества видов. Учет общей численности бациллярных форм в ночве представляет известный интерес, но для понимания почвообразовательного процесса необходимо вплотную подойти к анализу состояния в почве отдельных видов этой группы микроорганизмов. Такую попытку мы и осуществляем в дальнейшем. [c.239]

Метод Виноградского дает более правильное общее представление о численности почвенного микронаселения. Однако он трудоемок и не позволяет устанавливать видовох состав наблюдаемых микроорганизмов. При работе этим способом довольно часто получаются значительные отклонения в параллельных определениях, что маскирует происходящую в почве динамику бактерий. Поэтому при санитарных исследованиях почвы метод Виноградского используется редко. [c.561]

При внесении в питательную среду инокулята (посевной дозы микроорганизмов) в течение какого-то промежутка времени не наблюдается изменения численности популяции. Затем наступает период интенсивного размножения микроорганизмов и, соответственно, роста популяции с увеличивающейся скоростью, которая в определенный мохмент достигает максимального значения и потом снижается до нуля. Прирост биомассы прекращается и количество микроорганизмов поддерживается некоторое время на постоянном уровне, после чего происходит явно выраженное их отмирание и популяция как таковая перестает существовать. Таким образом, всегда различаются четыре периода, которые в наиболее общем виде можно охарактеризовать как начальный, период регулярного роста, период равновесия и период дегенерации. Переход от одного периода развития популяции к другому происходит плавно, и практически трудно достаточно четко определить точку перехода из одного состояния популяции в другое, особенно принимая во внимание невысокую точность методов определения концентрации растущей биомассы. Если же при этом учесть, что сам процесс культивирования может проводиться в отличающихся условиях (различные посевные дозы, различное количество инокулята, например его возраст, различный состав питательной среды), то становится понятным, почему в настоящее время различают от четырех до десяти отдельных этапов роста и состояний популяции. М. И. Тар-ков [31] предложил различать облигатные и факультативные фазы, подчеркивая тем самым тот факт, что на фоне эпиморфно-го чередования четырех-пяти основных (облигатных) стадий роста популяции внутри каждой облигатной стадии в зависимости как от особенностей метаболизма самого микроорганизма, так и конкретных условий его культивирования могут наблюдаться характерные периоды (факультативные фазы) рис. 1.1. [c.31]

Область применения уравнения (4.39) не ограничивается описанием изменения концентрации растворенного кислорода в условиях постоянной аэрации как функции численности по1пуля-ции. Если учесть, что Р1(Мо—Х)=С, то уравнение (4.39) можно использовать и для расчета величины коэффициента массопередачи по данным определения концентрации растворенного кислорода, концентрации микроорганизмов и их дыхательной активности. [c.278]

Теория буферных систем, используемых для обеспечения определенной величины pH стерильных питательных сред, разработана достаточно полно. Она позволяет с определенной точностью найтч соотношение концентраций компонентов буферной системы, необходимое для обеспечения практически любого значения pH питательной среды. Однако в процессе роста популяции в результате жизнедеятельности микроорганизмов это соотношение меняется, а соответственно изменяется и величина pH. Очевидно, что найти закономерность изменения величины pH можно, ус1ановив зависимость между концентрацией каждого и ко.мпонентов буферной системы и численностью популяции. [c.289]

О влиянии дихлордифенилтрихлорэтана на микрофлору и микрофауну почв имеются многочисленные данные [75,198, 233, 622]. Даже регулярное применение 10—200кг инсектицида на 1 га на протяжении многих лет не причиняло вреда бактериальной и грибковой флоре (включая стрептомицеты). Случайно обнаруженное увеличение числа бактерий и грибков имело место, вероятно, из-за гибели организмов, которые обычно регулируют численность почвенной флоры в определенных пределах. Связывающие свободный азот микроорганизмы, аммонификанты и окислители серы подавлялись лишь 1000 кг дихлордифенилтрихлорэтана на 1 га, а клубеньковые бактерии на клевере и сое — уже при 10 кг га. Активность почвы (образование углекислого газа, аммонификация, нитрификация, разложение целлюлозы) не нарушается применяемыми обычно количествами дихлордифенилтрихлорэтана. [c.218]

Насекомые-фптофаги обычно осуществляют регулирование, снижая жизнеспособность растений-хозяев и их конкурентоспособность в отношении других растеннй. В том, что нападение огневки обычно приводит к гибелн хозяина, оно сходно с регулированием численности насекомых-фитофагов хищниками. Совместное действие насекомых-фитофагов и патогенных микроорганизмов, несомненно, было причиной резкого сокращения засорения видами опунций в Австралии. Возможно, что исследования и разработка будущей стратегии борьбы с сорняками должны стремиться к определению вероятности достижения желательной степени специфичности возбудителя болезни по хозяину при совместном использовании его с насекомым-монофагом. [c.43]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология