ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методы определения молекулярной массы белков из "Химические основы жизни" Для определения молекулярной массы белков применяются различные химические и физико-химические методы. [c.78] Величины и Му, дают информацию о дисперсности вещества с высокой молекулярной массой. Если вещество состоит из молекулярных структур одинакового размера (монодисперсное), то в этом случае М = Л/ . Если же оно состоит из молекулярных структур различных размеров (полидис-персное), то М , будет больше, чем М . Отношение этих значений является ориентировочным показателем степени полидисперсности вещества, например белка. [c.79] Для определения молекулярных масс белков используется только одно коллигативное свойство их растворов — осмотическое давление. При определении осмотического давления можно путем подбора подходящих условий избежать эффекта влияния примесей небольших молекул и ионов, ассоциированных с белком, и получить достоверные результаты в тех случаях, когда изменение температуры замерзания раствора нельзя зафиксировать с помощью даже самых чувствительных приборов (из-за низкой концентрации растворов), а определение температуры кипения невозможно из-за деструкции биологических молекул. [c.79] Это соотношение справедливо только для разбавленных растворов белков. [c.80] Так как it/ = RT/M, то величина п/с (приведенное осмотическое давление) должна быть постоянной при всех концентрациях в случае идеального раствора. На опыте определяют величину я/с для ряда концентраций, а затем строят график зависимости я/с =/( с), который в большинстве случаев имеет линейный характер, что позволяет провести экстраполяцию на нулевую концентрацию, т. е. к бесконечному разбавлению. Полученную величину отрезка я/с используют для расчета М. [c.80] Коэффициент А называют константой взаимодействия, характеризующей меру отклонения исследуемого раствора от идеального. [c.80] Остановимся на определении молекулярных масс белков по данным седиментационного анализа. Если раствор макромолекул находится под действием очень сильного центробежного поля — при ультрацентрифугировании ускорение достигает (100 ООО... 500 000)g, то вследствие большой массы происходит седиментация молекул, т. е. их концентрация увеличивается от центра центрифуги к периферии. Одновременно с седиментацией происходит противоположный по тенденции процесс — диффузия макромолекул из области с большей концентрацией (на периферии) в центральную область с меньшей концентрацией. [c.81] Вернуться к основной статье