Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English
В судебно-медицинской практике имеют место случаи, когда вещественными доказательствами служат фиксированные ткани — так называемый мокрый архив .

ПОИСК





ВЫДЕЛЕНИЕ ДНК ИЗ ФИКСИРОВАННЫХ ТКАНЕЙ

из "Подготовка биологического материала лдя молекулярно-генетических идентификационных исследований при массовом поступлении неопознанных тел"

В судебно-медицинской практике имеют место случаи, когда вещественными доказательствами служат фиксированные ткани — так называемый мокрый архив . [c.174]
Ткани лучше всего фиксировать сразу после их получения, однако этот момент не является ключевым. Можно проводить амплификацию ДНК и в том случае, если ткани получены через семь (а возможно, и более) дней после смерти. Приемлемой матрицей для ПЦР является ДНК тканей, фиксированных в 10% забуференном формалине и залитых в парафиновые блоки. Вполне пригодным для ПЦР материалом являются ткани, фиксированные в этаноле или ацетоне и залитые в парафин. Несколько худшие результаты получаются при фиксации тканей фиксаторами Кларка и Замбони, параформальдегидом, формалином/этанолом/уксусной кислотой и совсем непригодны фиксаторы Зенкера, Карнуа, Буэна. Обработка препаратов кислыми растворами, декальцинирующими костную ткань, обычно приводит к деградации ДНК и тем самым препятствует амплификации. [c.174]
После заливки ткани в парафин стабильность ДНК повышается, однако вследствие ее медленной деградации в очень старых (более 10-летней давности) парафиновых блоках эффективность ферментативной амплификации снижается. Тем не менее в большинстве случаев с помощью ПЦР удается анализировать и 30-летние пара-финизированные препараты, а иногда и археологические образцы. [c.175]
Залитые в парафин фрагменты тканей можно депарафинировать с помощью ксилола или октана. [c.175]


Вернуться к основной статье


© 2024 chem21.info Реклама на сайте