ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Подготовка подвижной фазы из "Практическая газовая и жидкостная хроматография" Рекомендуется приготавливать и использовать растворитель в количестве, необходимом на день работы. [c.176] Дегазация. Перед началом работы подготовленную подвижную фазу надо дегазировать — освободить от растворенных пузырьков воздуха, которые нарушают нормальную работу хроматографа, вызывают дрейф нулевой линии, снижают уровень абсорбции. [c.176] Дегазацию осуществляют одним из следующих способов кипячением, продувкой током гелия (или азота), перемешиванием с использованием вакуума водоструйного насоса и, наконец, ультразвуковым перемешиванием. [c.176] Кипячение обычно проводят в течение 5-10 мин, используя обратный холодильник. Этот способ эффективен для индивидуальных элюентов и нежелателен для смешанных растворителей, содержащих компоненты со значительной разницей в температурах кипения. [c.176] Дегазация продувкой током инертного газа основана на низкой растворимости этого газа в жидкостях. При барботировании через слой растворителя продувочный газ достаточно быстро захватывает и уносит из системы растворенный воздух. Этот способ особенно предпочтителен при использовании легко окисляющихся растворителей [36]. [c.176] При ультразвуковом перемешивании сосуд с растворителем помещают на 5-10 мин в ультразвуковую ванну, заполненную водой. Эффективность процесса возрастает, если сосуд подключить к источнику умеренного вакуума. Вез использования вакуума данный вариант дегазации рекомендуется применять для смесирастворителей с заметно различающейся летучестью, поскольку он практически не изменяет их состава. [c.176] Очистка растворителя. Требования к чистоте растворителя прежде всего определяются выбранным детектором. Так, незначительная примесь олефинов в алканах не сказывается на работе рефрактометрического детектора, но практически не позволяет использовать УФ-детектор с поглощением на длине волны 260 нм. При этом добавка гептана к гексану не влияет на работу УФ-детектора. [c.176] При анализе в режиме адсорбционной хроматографии необходима тщательная осущка растворителя, поскольку влага в подвижной фазе заметно изменяет фактор удерживания и степень разделения компонентов. При градиентном элюировании требования к чистоте растворителей сильно возрастают. Примеси в элюенте могут концентрироваться в начальном участке колонки и при увеличении полярности подвижной фазы элюироваться, что является причиной появления на хроматограмме ложных пиков. [c.177] Безусловно должны быть удалены и механические примеси, для этого подвижную фазу пропускают через фильтры с размером пор 0,5 мкм. [c.177] Адсорбционную очистку проводят методом классической колоночной хроматографии, используя адсорбенты (оксид алюминия или силикагель) с больщой удельной поверхностью и размером зерен 0,1-0,5 мм. Сами сорбенты предварительно сущат при 250-300 °С несколько часов. Наилучшие результаты достигаются на колонках с двумя слоями сорбента нижний — AI2O3, верхний — силикагель. При массах сорбентов 100 г каждого в зависимости от их активности можно очистить 300-600 мл неполярных растворителей и в 1,5-2 раза меньще растворителей средней полярности (хлороформ, тетрагидрофуран). Качество очистки проверяют по УФ-спектрам. Растворители с полярностью, превыщающей в элюотропном ряду этилацетат, таким методом очистить нельзя из-за очень большого сродства их к сорбентам. [c.177] Элюенты, представляющие собой алканы, очищают от непредельных углеводородов концентрированной серной кислотой с последующей отмывкой дистиллированной водой до нейтральной реакции и осушкой. Высушенные растворители затем подвергают перегонке. Олефины можно независимо удалить колоночной хроматографией на силикагеле, пропитанном нитратом серебра (10% по массе). [c.177] Ацетонитрил очищают от примесей, поглощающих в УФ-свете, кипячением с перманганатом калия и последующей перегонкой. В колбу емкостью 2 л помещают 1,5 л ацетонитрила и 30 г перманганата калия, кипятят 1 ч с обратным холодильником и перегоняют с дефлегматором. [c.178] Изопропиловый спирт часто используется в качестве модификатора подвижной фазы. Самая нежелательная примесь — вода, с которой он образует азеотропную смесь, выкипающую при т. кип. 80,38°С (содержание водь в этой смеси отвечает 12,1% (по массе)). При небольщом количестве водь ее удаляют отгонкой, при содержании воды более 5-6% растворитель сущат над сульфатом натрия и выдерживают над цеолитом NaA. [c.178] При очистке метанола наиболее трудно отделяемой примесью является ацетон, который лучще всего удаляется обработкой гипоиодитом натрия 25 г иода в 1 л метанола вливают при перемещивании в 500 мл 1 М раствора гидроксида натрия и добавляют 150 мл воды. Через 6-10 ч отфильтровывают образовавшийся йодоформ, кипятят фильтрат с обратным холодильником (до исчезновения запаха йодоформа). Вольщинство примесей удаляют перегонкой на ректификационной колонке. Лля получения сухого продукта метанол сушат над цеолитом NaA или КА. [c.178] В качестве возможных примесей вводе могут присутствовать различные соли, микроколичества углеводородов. Наилучший путь очистки — деионизация на ионитах с последующей перегонкой в кварцевой посуде либо пропускание деионизованной воды через слой активированного угля. Для достижения высшей степени очистки воду пропускают через обращенно-фазный сорбент, который потом регенерируют промывкой метанолом, ацетонитрилом, тетрагидрофураном. Эффективно также жесткое УФ-облучение [36]. [c.178] Вернуться к основной статье