ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Детекторы из "Практическая газовая и жидкостная хроматография" Смешение растворителей и системы формирования градиентного элюирования. В жидкостной хроматографии часто подвижная фаза представляет собой смесь двух и более компонентов, соотношение которых в процессе анализа меняется по определенной программе. Таким образом, в системе подачи подвижной фазы необходимо предусмотреть контроль за соотношением растворителей. [c.179] Лля обеспечения градиентного элюирования используют два способа. [c.180] Системы ввода пробы. В ВЭЖХ они делятся на две группы в одних приборах проба вводится микрошприцем с использованием принципа шлюзового устройства, в других — дозирующим краном со сменными калиброванными петлями. [c.180] На рис. П1.3 представлена более совершенная система ввода пробы. Порцию анализируемой смеси отбирают медицинским шприцем и затем заполняют ею сменную дозирующую петлю шестиканального (иначе — шестиходового) поворотного крана. [c.180] Кран-дозатор с изменяемым объемом сменной петли (дозы). [c.181] Эта процедура выполняется при атмосферном давлении. Растворитель, находящийся ранее в петле, замещается пробой и через специальный капилляр вытекает в слив. При повороте ручки крана в положение ЛОЗИРОВ АНИЕ подвижная фаза выталкивает содержимое петли крана в хроматографическую колонку. Перед каждым новым вводом анализируемого образца петлю следует промывать избытком пробы, чтобы избежать ее разбавления элюентом. Для выполнения этой процедуры кран переводится в начальное положение ОТБОР ПРОБЫ. В целом, работа устройства базируется на тех же принципах, что и работа газовых кранов-дозаторов (см. раздел П. 1.1). [c.181] Лавление или скорость потока в разделительной колонке при введении пробы не должны нарушаться. Как уже отмечалось, в жидкостной хроматографии предъявляются более строгие требования к прокладкам из полимерных материалов они не должны набухать в растворителях. Более всего удовлетворяют этим требованиям фторированные эластомеры. Система ввода пробы может быть полностью автоматизирована. Все современные жидкостные хроматографы снабжены автосамплерами [81]. [c.182] Колонка — наиболее важная часть любой хроматографической системы, поскольку результат хроматографического анализа в существенной степени определяется ее разделительной способностью. [c.182] В практической ЖХ используют обычные аналитические колонки диаметром 3-5 мм и длиной 5-25 см и микроколонки диаметром 0,5-1 мм и длиной от 5 до 10 см. Вольщинство стандартных колонок длиной 25-30 см заполнены сорбентом с размером частиц 5-10 мкм, число теоретических тарелок в них может достигать (5 — 10) 10 по неудерживаемому компоненту. [c.182] Колонку заполняют и закрывают с обеих сторон металлокерамическими фильтрами (фритами) для предотвращения высыпания сорбента. Один из вариантов заполнения колонок заключается в создании суспензии подходящего сорбента. Чтобы полностью удалить суспендирующую жидкость и уплотнить насадку, колонку некоторое время промывают элюентом при повыщенном давлении. Этот метод получил название метод сбалансированной плотности . Особенно сложно приготовление обращенно-фазных колонок, и главная опасность при этом —-неоднородность упаковки. При заполнении колонок такими сорбентами возникает больщой электрокинетический потенциал, а так как привитые сорбенты являются изоляторами, то на их поверхности скапливается избыточный заряд, расталкивающий частицы. Лля снятия заряда в суспензию добавляется электролит (ацетат натрия). [c.182] Между дозатором и аналитической колонкой помещается предколонка, заполненная тем же сорбентом, что и основная, и предохраняющая основную колонку от влаги и сильносорби-рующихся примесей (это особенно важно при анализе биологических объектов). [c.182] Разрешение и скорость разделения в жидкостных хроматографических колонках могут быть существенно увеличены за счет оптимизации геометрических параметров колонки, условий хроматографического анализа, характеристик сорбента, скорости потока подвижной фазы, величины пробы. Лля получения максимальной эффективности колонки рекомендуется использование сорбента с возможно меньшим размером частиц. [c.183] В основном хроматографические колонки для жидкостной хроматографии рассчитаны на комнатную температуру. Однако в ряде случаев, например при анализе полимерных систем, необходимо работать при повышенных температурах (для повышения растворимости полимеров в подвижной фазе). [c.183] Во всех современных жидкостных хроматографах предусмотрено термостатирование. Максимальная рабочая температура для силикагелевых колонок составляет 120 °С, а для модифицированных сорбентов на основе силикагеля — 80 °С. В последнее время успешно развивается метод высокотемпературной жидкостной хроматографии (от 100 до 200 °С), налажен выпуск соответствующей аппаратуры. [c.183] В ходе развития жидкостной хроматографии было испытано более 20 типов различных детекторов [35, 36, 80-84, 86]. [c.183] Детектор — это специальный блок хроматографической системы, реагирующий на различие в составе подвижной фазы, не содержащей компонентов разделяемой смеси, и подвижной фазы с разделенными компонентами, выходящими из колонки. Сигнал детектора после необходимого усиления подается на регистрацию пишущим потенциометром или компьютерными системами типа МультиХром (см. раздел IV.5). [c.183] Универсальный детектор реагирует на все соединения. Типичным примером является рефрактометр. [c.184] Идеальным детектором был бы такой, который совмещал бы в себе следующие свойства [36]. [c.184] Важнейшие из названных характеристик на примере детектирующих устройств, используемых в газовой хроматографии, рассмотрены в разделе II. 1.4. [c.184] Вернуться к основной статье