ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Клеточный цикл и цикл роста из "Методы культуры клеток для биохимиков" Растущие клетки регулярно делятся примерно один раз в каждые 24 часа. В период между делениями, т. е. в интерфазе, клетки удваивают количество ДНК в течение определенной фазы клеточного цикла, так называемой фазы синтеза ДНК или фазы 8. Фаза 8 отделена от клеточного деления или митоза двумя периодами 01 и 02 (см. рис. 10.1). При отсутствии каких-либо ограничений клетки равномерно распределены по клеточному циклу, и если количество клеток удваивается через правильные промежутки времени, то говорят, что культура находится на стадии экспоненциального роста. [c.22] Обычно после короткого периода экспоненциального роста тот или иной фактор становится лимитирующим. Это может происходить в результате истощения какого-либо фактора среды или же в результате того, что культивируемые клетки полностью покроют поверхность, на которой они растут. (см. разд. 2.3.3). Скорость роста культуры при этом замедляется, и количество клеток в культуре достигает насыщения (конечная плотность клеток). Когда дальнейшие деления клеток прекращаются, наступает стационарная фаза роста культуры. При восстановлении в культуре лимитирующего фактора клетки возвращаются в фазу 01 клеточного цикла, происходит цикл синтеза ДНК, после чего клетка делится. Имеется несколько теорий, объясняющих такой тип контроля роста (разд. 10.4), но все они исходят из предположения, что контроль осуществляется на каком-то этапе, расположенном вскоре после деления. После прохождения этого этапа клетки включаются в клеточный цикл и делятся. [c.22] Большая часть клеток у животных находится под такой формой контроля роста, что они прекращают продвижение по клеточному циклу, вскоре после митоза. Следовательно, для стимуляции первичной клеточной культуры, прежде чем клетки возобновят движение по циклу к фазе деления, следует устранить ограничение роста. Клетки некоторых быстро растущих опухолей утрачивают чувствительность к контролю роста, и поэтому полученные из опухолей первичные клетки легко адапти руются к росту в культуре и могут дорастать до более высокой плотности по сравнению с клетками из нормальных тканей (см. ниже). [c.22] В культурах иногда образуются гигантские клетки — особенно в случаях роста в неоптимальных условиях. Образование таких клеток обусловлено тем, что растущие клетки теряют способность делиться и могут увеличиваться в размере, пока не достигнут в диаметре 1 мм и более. Частота образования гигантских клеток заметно увеличивается в результате облучения (Tolma h, Mar us, 1960). Наличие небольшого количества гигантских клеток Б популяции, вероятно, не представляет особенных проблем для биохимических исследований, но если их число растет, то это отражает плохие условия культивирования такие культуры должны быть выбракованы и заменены новыми культурами, растущими в нормальной среде. [c.23] Вернуться к основной статье