ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Приготовление препаратов для люминесцентной микроскопии из "Руководство к практическим занятиям по микробиологии Изд.3" Препараты живых клеток. На предметное стекло в каплю раствора акридина оранжевого в воде или 0,5%-ном Na l в разведении 1 10 000 вносят исследуемую культуру микроорганизмов и накрывают покровным стеклом. Через 2—10 мин микроскопируют при увеличении объектива 40X или 90X с вазелиновым маслом. [c.112] Иммунофлуоресцентное окрашивание непрямой метод. Включает два этапа. Препарат фиксируют нагреванием, наносят каплю нелюминесцирующей гомологичной иммунной сыворотки определенного разведения и оставляют на 20—30 мин во влажной камере. Затем осторожно промывают в течение 5 мин. На втором этапе на препарат наносят каплю меченого антикроличьего 7-глобулина, разведенного до так называемого окрашивающего титра. Время инкубации на втором этапе и окрашивающий титр определяют эспериментально. После этого препарат осторожно промывают и микроскопируют при увеличении 90X. Непрямой метод обладает принципиальным преимуществом, так как, имея лишь одну люминесцирующую сыворотку, можно отыскать большое число разных антигенов, используя стандартные кроличьи сыворотки. При непрямом методе, однако, крайне важен контроль, включающий инкубирование препарата на втором этапе непосредственно с меченой сывороткой обработку препарата гетеро-логичной меченой сывороткой обработку препарата на первом этапе нормальной или гетерологичной сывороткой, не содержащей антител к исследуемому антигену. [c.113] Вернуться к основной статье