ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Коэффициент экстинкции из "Биофизическая химия Т.2" На рис. 7.3,/4 схематически изображены установки для измерения поглощения света. Падающий свет обладает интенсивностью /р при длине волны X. Его путь в образце (обычно это раствор поглощающих молекул некоторой концентрации С, выражаемой в молях на литр) равен / см. Свет, прошедший через образец, имеет интенсивность I. [c.23] Схематическое изображение установок для измерения поглощения света. А. Измерение поглощения света. Б. Регистрация разностных спектров. [c.23] Измерение спектра поглощения обычно имеет своей целью определение величины с. Максимальные значения и длины волны, при которых они наблюдаются (X ), табулируются. Значения е для разных хромофоров варьируют от 1 М см до более чем 10 М см (см. Дополнение 7.2). [c.24] Наиболее точно величину у4 удается измерить в том случае, если она лежит в интервале от 0,1 до 2. При А 0,1 образец поглощает лишь ничтожную долю падающего света, если жеу4 превышает 2, это означает, что на детектор падает очень мало света. Для хромофоров с = Ш М см (таких, как основания нуклеиновых кислот) из уравнения (7.34) получаем, что молярную концентрацию образца толщиной 1 см следует выбирать в пределах от 10 до 10 . [c.24] В случае макромолекул часто бывает неудобно использовать молярную экстинкцию. Это связано либо с тем, что ее значение очень велико, либо с тем, что мы не знаем молекулярную массу полимера. Поэтому на практике обычно пользуются величиной экстинк-ции, приходящейся на один моль мономерных звеньев. Например, для полинуклеотидов концентрацию выражают как суммарное число молей фосфатов в одном литре. В научной литературе эти две величины нередко путают. К счастью, в большинстве случаев экстинк-ция в расчете иа моль макромолекул отличается от экстинкции, приходящейся на одно звено, по меньшей мере в 10 раз, что позволяет избежать ошибки. [c.24] Если бы каждая молекула поглощала весь падающий на нее свет, эффективность поглощения света была бы максимальной и доля поглощенного света равнялась быкак это изображено на рисунке. Таким образом, приведенное равенство и было бы искомым соотношением между поглощением и размерами молекул. [c.25] Вернуться к основной статье