ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Субкультивирование из "Культура животных клеток Методы" Свежевыделенные культуры носят название первичных культур до начала пассирования или субкультивирования. Клетки первичной культуры обычно гетерогенны и характеризуются малым пролиферативным пулом, но в них наиболее полно представлены типы клеток той ткани, откуда они были получены, а также четко обнаруживается экспрессия ряда свойств, присущих данной ткани. Субкультивирование обеспечивает возможность продления существования культуры (в результате субкультивирования получаются линии клеток), возможность клонирования (см. гл. 4 и 8), исследования и сохранения клеток (гл. 4), а также получения более однородных популяций. При этом во многих случаях субкультивирование приводит к потере специализированных клеток и дифференцировочных признаков, если не принимаются меры для отбора специализированных линий, и сохранения или реиндукции дифференцировочных свойств (см. ниже). [c.16] Главным преимуществом получения клеточных линий из первичных культур является наработка большого количества стабильного материала, пригодного для продолжительного использования. [c.16] После нескольких пересевов линия клеток либо гибнет (ограниченная линия клеток), либо трансформируется и становится постоянной клеточной линией. Не всегда ясно, возникают стволовые клетки постоянной культуры в ходе пассирования, или они предсуществуют в замаскированной форме в популяции клеток ограниченной линии. Различия в свойствах этих клеток небольшой период времени, предшествующий их появлению (иногда несколько месяцев), позволяют предположить мутационную природу их появления (хромосомные перестройки, транслокации, частичное или полное неспаривание или точечные мутации). Нельзя исключить и возможность предсуществования бессмертных клеток, особенно в культурах, полученных из опухолей. [c.16] К преимушествам постоянных линий клеток относятся их более высокая скорость роста, возможность достижения более высокой плотности, а следовательно, и большего выхода биомассы, их меньшая зависимость от сыворотки и возможность поддержания в более простых средах, а также их способность к росту в суспензии. К недостаткам этих линий относятся повышенная хромосомная нестабильность, отклонение от фенотипа донора и утрата специфических тканевых маркеров. [c.17] Клетки большинства культур, включая первичные, размножаются в форме монослоя, прикрепившись к стеклу или пласти- овому субстрату. Некоторые культуры, главным образом трансформированные клетки, кроветворные клетки и асцитные опухоли, могут размножаться в суспензии. Этим обеспечивается простота размножения (субкультивирование требует только разведения без трипсинизации), отсутствие необходимости увеличения плошади поверхности роста наряду с возрастанием объема, простота сбора клеток и возможности получения в случае необходимости равновесной культуры (см. гл. 3). [c.17] Вернуться к основной статье