ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Межмолекулярно сшитые белки из "Физиологические активные полимеры" По-видимому, наиболее популярным гoмoбифyнкциoнaльны реагентом до сих пор остается глутаровый диальдегид. Он бы стро и эффективно реагирует с аминогруппами белка в ней тральной или слабо щелочной среде. Возможно участие в реак ции также тиольных групп. В зависимости от условий реакцш образуются растворимые или нерастворимые конъюгаты. [c.194] Поскольку эти структуры могут легко вступать в дальш шие реакции с аминогруппами, сделать какие-либо выво о строении белковых конъюгатов, полученных с помощью г. [c.194] Основные побочные реакции при ацилировании — гидролиз активированного производного карбоновой кислоты. Образование амидной связи в результате сшивания приводит к потере положительного заряда на атоме азота. [c.196] Имеющийся широкий набор бифункциональных реагенте позволяет химически связать практически любые два белк Основная задача заключается в получении конъюгата необх( ДИМОЙ структуры (число связанных между собой молекул) селективном проведении процесса по определенным функц нальным группам. От того, как решена эта задача, завис) функциональные свойства полученных конъюгатов, их одноро, ность и воспроизводимость свойств. [c.198] Как уже отмечалось, сшитые белки нашли применение в ряде областей экспериментальной биологии и медицины. Здесь будут кратко рассмотрены три из них ферментные конъюгаты для потенциального терапевтического применения в качестве биокатализаторов, ферменты, сшитые с антителами и их фрагментами для иммунологических целей, иммунотоксины — белковые конъюгаты, целенаправленно поражающие опухолевые клетки. Сшитый гемоглобин как кровезаменитель — переносчик кислорода описан в гл. 7. [c.199] Применение межмолекулярно сшитых ферментов для терапевтических целей преследует те же цели, что и в случае полимер-ферментных конъюгатов увеличение сроков циркуляции в кровяном русле, снижение иммуногенности и стабилизацию фермента при максимальном сохранении ферментативной активности. В отсутствие полимерной защитной оболочки достижение этих целей более сложно. В то же время нарушение нативной конформации белка при межмолекулярном сшивании обычно меньше, чем при модификации полимерами, содержание белка в конъюгате почти 100 %, а внутримолекулярные сшивки ответственны за наблюдаемую в ряде случаев стабилизацию. [c.199] Сшивание трипсина с альбумином человека и свойства конъюгатов как потенциальных тромболитических агентов изучены в работах [137,138]. Сохранение ферментативной активности зависело от условий реакции, причем активность снижалась с увеличением концентрации сшивающего агента, pH и продолжительности реакции, т. е. при многоточечных сшивках и образовании массивных конгломератов (М 2 млн.). Блокирование свободных альдегидных групп приостанавливало снижение активности. Оптимум pH конъюгатов оказался не смещенным, а взаимодействие с соевым ингибитором снижено в результате влияния одноименно с ним заряженной альбуминовой части конъюгата. Активность по казеину была лишь 17 % для невосстановленного конъюгата и 84 % для восстановленного борогидридом. Повышение физиологической активности белка при снижении концентрации сшивающего агента (глутарового альдегида) наблюдалось и в других случаях. [c.200] Вернуться к основной статье