ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кинетика окисления аскорбиновой кислоты из "Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы живых организмов" Кинетические закономерности пероксидазного окисления АК в стационарных условиях практически не исследованы. Предложен калориметрический метод определения пероксидазного окисления АК. Обнаружено изменение стехиометрии реакции между АК и пероксидом водорода в зависимости от условий протекания пероксидазного процесса. Показано, что АК в пероксидазном процессе окисляется пероксидом водорода в стехиометрическом соотношении 1 1 при pH 5,0 и 1 2 при pH 7,4. Отмечено, что при pH 7,4 кинетика утилизации H Oj при пероксидазном окислении АК имеет аномальный по сравнению с другими субстратами характер, что связано, по-видимому, с модификацией фермента в процессе реакции [Титов и др., 1992]. Однако более подробного исследования кинетических особенностей реакции не проводилось. Поэтому нами изучена кинетика реакций пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты, катализируемое пероксидазой хрена [Рогожин, Верхотуров, 1997]. [c.54] Показано, что при окислении аскорбиновой кислоты, в действии пероксидазы реализуется сложный регуляторный механизм. [c.54] Аналогичное предположение образования тройного промежуточного комплекса Е с двумя молекулами донора водорода было высказано для объяснения кинетических закономерностей пероксидазного окисления люминола и пирогаллола в стационарных условиях [Dure, ormier, 1963 1964]. [c.56] В каталитическом процессе пероксидазного окисления одной и более молекул АК принимают участие ионогенные группы фермента с рК 6,0 и 6,5 (рис. 10). Протонирование этих функциональных групп активного центра пероксидазы ускоряет каталитический процесс. [c.56] Е — исходный фермент и его промежуточные соединения 1 и 2, соответственно, АН — аскорбиновая кислота, Е, — АН , Е — АН-, АН- — Е — АН , Е — (п + 2)АН2 — комплексы одной, двух и (п + 2) молекул аскорбиновой кислоты с промежуточными соединениями Е, и Е , к,, Ц, кз и к — каталитические константы. [c.57] Схема 1 предполагает, что пероксидазное окисление АК осуществляется, если с окисленными формами фермента (Е и Е ) связываются одна или две молекулы АК. При этом связывание молекулы субстрата в одном из участков активного центра пероксидазы инициирует каталитический процесс, тогда как занятость сразу двух участков субстратами проявляется в активировании фермента. Однако ингибирующее действие субстрата реализуется при связывании нескольких (6—7) молекул Ак в области активного центра или в месте расположения регуляторного участка. [c.57] Вернуться к основной статье