ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Влияние индолил-3-уксусной кислоты на реакции пероксидазного окисления о-дианизидина и гидрохинона из "Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы живых организмов" Таким образом предполагается, что центр связывания ИУК может располагаться вдали от активного центра пероксидазы [Савицкий и др., 1998]. Причем оксидазное окисление ИУК может возрастать в присутствии гидрофобных аминокислот, тогда как полярные аминокислоты почти не оказывают влияние на каталитический процесс оксидазного окисления ауксина. Установлена прямая корреляция между гидрофобностью аминокислот и степенью их влияния на скорость окисления ИУК [Park, Park, 1987]. Однако в литературе отсутствуют данные по влиянию ИУК на пероксидазное окисление различных неорганических и органических субстратов, катализируемое пероксидазой растений. Возможно, что проведение таких исследований позволило бы определить расположение активного центра фермента на поверхности белковой глобулы, установить участки индивидуального связывания ИУК и исследуемых субстратов на ферменте. [c.74] Поэтому проведенное нами изучение реакций совместного пероксидазного окисления о-дианизидина, гидрохинона и ферроцианида калия в присутствии индолил-З-уксусной кислоты позволило установить следующие закономерности [Рогожина, Рогожин, 2003]. Ауксин ингибирует пероксидазу в реакции окисления о-ди-анизидина по конкурентному типу (рис. 19), тогда как в реакциях окисления гидрохинона при кислых значениях pH проявлялся неконкурентный характер ингибирования (рис. 20), переходящий при pH 6,5 в смешанный тип (рис. 21). Присутствие ауксина не влияло на пероксидазное окисление ферроцианида калия. [c.74] Из рН-зависимостей IgK., в реакциях окисления о-дианизидина определяются две ионогенные группы с рК 4,7 и 6,5 (рис. 23, кривая 1), а гидрохинона — одна ионогенная -4,5 группа с рК 6,8 (рис. 23, кривая 2). [c.77] Проявление этих групп, по-видимо-му, вызвано наличием в составе мо- 5 5 лекулы индолил-З-уксусной кислоты карбоксильной группы с рК 4,5 [Досон и др., 1991] протонирование и депротонирование которой позволяет выявить две ионогенные функциональные группы активного центра пероксидазы, принимающие участие в пероксидазном окислении о-дианизидина и одну — в окислении гидрохинона. [c.77] Выявленные эффекты влияния ИУК на пероксидазное окисление аскорбиновой кислоты, гидрохинона и о-дианизидина, катализируемое пероксидазой, имеют важное биологическое значение. ИУК может регулировать пероксидазное окисление медленно окисляемого субстрата, имея специфичный участок связывания в составе дистального домена активного центра пероксидазы. По-видимому, избирательность типов ингибирования пероксидазы ИУК обусловлена специализированностью ауксина служить оксидазным субстратом фермента. При этом ИУК может изменять направленность реакций пероксидазы с одного типа на другой, меняя специфичность фермента с пероксидазного на оксидазный, превращая пероксидазу в высокоспецифичную оксигеназу, генерирующую свободные радикалы необходимость в которых может возникать у растений в процессе развития. При этом ИУК может выполнять роль триггера в реакциях окисления, катализируемых пероксидазой. Реализация действия ауксина возможно проявляется при выходе семян из состояния вынужденного покоя. В этот период в семенах резко возрастает активность пероксидазы, которая способна активировать процессы прорастания. Возможным механизмом действия фермента в этих процессах может быть его способность к генерированию свободных радикалов, необходимых на конечных этапах эмбриогенеза для активизации механизмов прорастания. [c.78] К антиоксидантам относятся вещества, способные подавлять образование свободных радикалов в живых организмах. Антиоксиданты можно разделить на низко- и высокомолекулярные соединения [Кения и др., 1993]. К группе низкомолекулярных ан-токсидантов относятся мочевина, мочевая кислота, глутатион, аскорбиновая кислота, кверцетин, дигоксин и др. [Кения и др., 1993 Дубинина, Шугалей, 1993 Владимиров, Арчаков, 1972]. Кг-руппе высокомолекулярных каталаза, СОД, пероксидаза. [c.78] Для объяснения кинетики ингибирования пероксидазы ди-гоксином в реакции индивидуального и совместного окисления о-дианизидина и ферроцианида может быть предложена схема 6. [c.80] Тогда как кверцетин ингибировал пероксидазу по смешанному типу (рис. 25). При связывании с ферментом кверцетин понижал сродство и эффективность превращения о-дианизидина. [c.80] Наблюдаемый эффект является следствием того, что кверцетин является медленно окисляемым субстратом пероксидазы скорость окисления которого в присутствии быстро окисляемого субстрата возрастает, что и создает конкуренцию. [c.81] На основании полученных данных совместное пероксидазное окисление аскорбиновой кислоты и о-дианизидина можно описать следующей схемой 8. [c.82] Скорость пероксидазного окисления АК в присутствии о-диа-низидина может превышать скорость индивидуального окисления аскорбиновой кислоты более, чем на два порядка, а о-дианизидина— в 1,5—2,0 раза. [c.82] Таким образом, трудно окисляемый субстрат, каким является аскорбиновая кислота, по-видимому, эффективнее окисляется радикалами быстро окисляемого субстрата о-дианизидина, чем соединениями Е, и Е пероксидазы. При этом на кривых рН-зависимо-стях 1 к реакций как индивидуального, так и совместного с о-диани-зидином окисления аскорбиновой кислоты проявлялась ионогенная группа с рК — 6,5 (рис. 26). [c.82] Взаимное влияние субстратов, а также регуляторное действие ингибиторов и активаторов возможно если активный центр пероксидазы представлен в ввде протяженной субстратсвязываю-щей области, состоящей из нескольких участков, где могут одновременно связываться как субстраты, так и эффекторы. Причем связывание последних проявляется в регулировании активности пероксидазы. [c.83] Установлено, что в зависимости от характера заместителя у атома азота в положениях 2 и 10, производные фенотиазина могут обладать противогистаминным, холинолитическим, седативным и нейролептическим действием. [c.84] Ультрафиолетовые спектры 10-алкил производных фенотиазина в этаноле имеют по два максимума поглощения в области 290—330 нм у 10-ацилпроизводных наблюдается гипсохромное смещение обоих максимумов. ИК-спектры в области 4000-250 СМ насчитывают по 20—25 полос поглощения [Азамасцев, Яскина, 1975]. [c.84] Вернуться к основной статье