ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Очистка белков из "Основы биохимии" выделенные описанными способами, всегда содержат некоторое количество низкомолекулярных примесей, особенно ионов солей. Для полного освобождения от этих примесей белки подвергают дальнейшей очистке путем диализа, электродиализа, ультрафильтрации и перекристаллизации, гельфильтрации и другими способами. [c.32] Очистка белков методом диализа состоит в длительном, в течение нескольких суток, пропускании воды через сосуд, в который погружен диализацион-ный мешочек. Его готовят из материалов, хорошо проницаемых для низкомолекулярных соединений и ионов, но не пропускающих крупных молекул белка. Материалом для полупроницаемых мембран служит целлофан, размер пор которого можно изменять в широких пределах обработкой раствором Zn l2. Внутрь диализационного мешочка (камеры) помещают раствор белка. Камеру, как правило, снабжают капиллярной трубкой. В нее в первые часы диализа устремляется часть белкового раствора, объем которого возрастает вследствие поступления воды внутрь камеры (рис. 12.7). [c.32] Полупроницаемые мембраны высокой прочности из нецеллюлозных материалов с калиброванными порами, через которые проходят низкомолекулярные вещества но не проникают высокомолекулярные белки, используют для очистки белков методом ультрафильтрации. Белковый раствор продавливают через такую мембрану сжатым газом или центробежной силой. Белок, остающийся в процессе ультрафильтрации на мембране, не только очищается от низкомолекулярных соединений и ионов, но и концентрируется. Если подобрать такой размер пор в мембране, что через них будут проходить не очень крупные белки, а большие белковые молекулы будут задерживаться, то ультрафильтрация может служить для фракционирования белков. [c.33] Долгое время считали, что белковые вещества существуют только в аморфном состоянии. Однако в 1906 г. наш соотечественник А. Д. Розенфельд впервые закристаллизовал оксидазу, выделенную из редьки, а в 1926 г. американский ученый Д. Самнер получил другой кристаллический белок—фермент уреазу (от лат. urea—мочевина). Затем в течение последующих лет были получены в кристаллическом состоянии десятки белков. [c.33] Несколько видов белковых кристаллов приведено на рис. 13. Кристаллические белки,, особенно полученные в результате перекристаллизации, отличаются высокой степенью чистоты. [c.33] Вернуться к основной статье