ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кальциевые компетентные клетки из "Генетическая инженерия" Небольшие модификации, введенные в 1972 г. С. Коэном с сотрудниками в описанную методику, позволили осуществить трансформацию клеток, обработанных хлоридом кальция, плазмидными ДНК. При этом компетентность индуцировалась лишь у 0,1-1 % клеток культуры Е. oli. Дальнейшие исследования показали, что частоту плазмидной трансформации можно повысить разными способами подвергая смесь обработанных СаС1г клеток и ДНК тепловому шоку (42 °С) вводя в эту смесь моновалентные катионы обрабатывая клетки дополнительно органическими растворителями, сульфгидрильными реагентами выращивая клетки в среде с повышенным содержанием Mg2+ и др. Кропотливая систематическая работа по подбору штаммов и модификации кальциевой методики позволяет в ряде случаев повышать частоту плазмидной трансформации с 10 5 до 10 3 трансформантов на молекулу плазмиды. [c.84] Вернуться к основной статье