ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Клонирующие плазмидные векторы из "Генетическая инженерия" Репликация плазмид в значительной степени зависит от клетки-хозяина. Некоторые плазмиды реплрщируются таким образом, что в клетке они находятся в одной или нескольких копиях. Это так называемые плазмиды со строгим контролем репликации. Другие же плазмиды могут иметь в клетках 10-200 копий. Такие плазмиды находятся под ослабленным контролем репликации. Количество копий плазмид с ослабленным контролем репликации можно увеличить до нескольких тысяч на клетку, если блокировать синтез белка в клетке обработкой хлорамфенишлом. В отсутствие белкового синтеза репликация плазмид с ослабленным контролем продолжается, в то время как репликация ДНК бактериальной хромосомы и плазмид со строгим контролем прекращается. [c.85] Рассмотрим некоторые векторные плазмиды клеток Е. соИ. [c.85] Как видим, первые векторные плазмиды pS lOl и olEl имели ряд недостатков. В этих плазмидах клонировали фрагменты ДНК только по соШ-месту, причем в обоих случаях отбор гибридных ДНК не очень прост. Поэтому в ряде лабораторий бьши развернуты исследования, направленные на создание более удобных клонирующих векторов на основе плазмид. [c.88] Таким образом, плазмида рМВ9 может быть использована для клонирования фрагментов. [c.88] Плазмида pBR322 оказалась настолько хорошим клонирующим вектором, что в течение ряда лет она использовалась в подавляющем большинстве генно-инженерных работ, в которых применялись плазмидные векторы. Кроме того, на основе плазмиды pBR322 получены другие векторные производные. [c.90] За начало отсчета нуклеотидов принят центр участка узнавания рестриктазы ЕсоШ. [c.91] Вернуться к основной статье