Сканирование линкером, метод

Рис. 11.7. Метод сканирования линкером позволяет заменить короткую последовательность гена дикого типа последовательностью линкера, точно соответствующего по размеру вводимым делециям.

Более детальный анализ последовательностей, необходимых для функционирования промотора, производится с помощью метода сканирования линкером. Этот подход позволяет вводить наборы мутантных последовательностей в определенные участки гена. Постановка опыта изображена на рис. 11.7. В область исследуемого гена вводят делеционные мутации. В одном случае создается набор фрагментов, имеющих делеции с 5 -конца гена, в другом случае-с З -конца. Делектируемые области заменяются последовательностью линкера, который представляет собой короткий синтетический олигонуклеотид, содержащий участок узнавания определенной рестриктазой. Фрагменты обоих типов расщепляют рестриктирующей эндонуклеазой и затем соединяют друг с другом, таким образом, чтобы произошло объединение линкеров (смотри реакцию расщепления рестриктирующими ферментами в гл. 17). [c.152]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология