Бычий меченный флуоресцеином

Изображен поперечный срез лимфатического узла кролика, клетки которого содержат антитело против альбумина бычьей сыворотки (АБС) на четвертый день после повтор-лой иммунизации. Многие клетки дают желто-зеленую флуоресценцию флуоресцеина (па рисуике белые), тогда как фон из других клеток выглядит голубоватым ([ а рисунке серый). Антитело находится в цитоплазме. Ткань фиксировали 95%-ным этанолом при 4°С в течение ночи, затем обезвоживали в холодном 100%-ном этаноле, ск ветляли в холодном ксилоле и погружали в парафин при температуре ниже СО°С. Затем делали срез, депарафинировали его и гидратировали. Далее срез обрабатывали АБС (0,5 мг/мл в физиологическом растворе) и промывали. В результате АБС связывается только с участками, содержащими антитело, а несвязанный АБС удаляется при промывке. Анти-АБС метили флуоресцеином (две молекулы на молекулу белка) и наносили тонким слоем иа срез, чтобы могла пройти реакция с любым связанным АБС. При этом обнаруживается антитело, которое находилось в клетках с самого начала. Таким способом было показано. что клетки лимфатических узлов синтезируют анти-АБС. (Любезно предоставил Альберт Коонс.) [c.57]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология