Тимин, определение в воде

После окончания разделения в первом направлении пластинку высушивали, вымачивали в метаноле, снова подсушивали и начинали элюцию во втором направлении (тоже с удлинительным фитилем). Элюцию начинали водой до старта, а затем 0,3 М водным раствором сульфата аммония вплоть до продвижения фронта элюента на 4—5 см по фитилю. Пятна локализовали авторадиографией, затем вырезали и просчитывали радиоактивность методом регистрации черепковского излучения [Остерман, 1983]. На рис. 166 представлено окончательное расположение хроматографических пятен. Несколько неожиданным является сильно сдвинутое вправо положение пятна рТр. По-видимому, 0,3 М сульфат аммония легко вытесняет все нуклеозиддифосфаты из ионной связи с PEI, и решающую роль в определении скорости миграции начинает играть сорбция оснований на целлюлозе. Метильная группа тимина препятствует сорбции. В пользу такой трактовки говорит и соотношение положений пятен рСр и рт Ср. рТр обгоняет рт Ср вероятно, по той причине, что рТр уже движется вслед за фронтом элюции во втором направлении, когда этот фронт еще только достигает пятна рт Ср и начинается растворение находящегося в нем материала. [c.492]

Повреждение оснований ДНК. Значение радиационных повреждений пуриновых и пиримидиновых оснований ДНК вначале было выяснено на бактериях. В последнее время разработано много чувствительных тестов для определения указанных повреждений, особенно тимина. Эти повреждения линейно зависят от дозы и, вероятно, возникают в результате взаимодействия со свободными радикалами воды ОН. Радиационно-индуцированные повреждения тиминовых оснований в клетках млекопитающих встречаются чаще, чем однонитевые разрывы ДНК. Механизм эксцизионной репарации (см. рис. 2.7), по-видимому, обусловливает быстрое и эффективное удаление поврежденных оснований у бактерий и в клетках млекопитающих. У прокариот нерепарированные повреждения оснований являются важными детерминантами гибели, и имеются доказательства, что подобные повреждения могут играть важную роль для клеток высших животных. [c.40]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология