Карбоксипептидаза диализ

С-концевую последовательность самой карбоксипептидазы В недавно определили Фольк и др. [9]. Фермент сперва денатурировали 0,2%-ным раствором додецилсульфата натрия, обрабатывали 0,005 М раствором о-фенантролина (ингибитор) и длительно диализовали против 0,02Л1 вероналового буфера pH 7,5, содержащего хлористый натрий (0,Ш). Денатурированный фермент инкубировали при 25° с карбоксипептидазой А (0,5% субстрата отношение фермент/субстрат-1 80) в присутствии 0,001 М диизопропилфторфосфата. Была установлена последовательность . ..- (Вал-Сер)-Асп (NH2)-Tpe. Из того же препарата после гидразинолиза с последующим динитрофенилированием (с.м. стр. 191) было получено [c.189]

Препараты карбоксипептидаз А и В бьппю содержат свободные аминокислоты и протеолитические ферменты. Эндопептидазы можно инактивировать обработкой фермента (1 мг/мл) 50-кратным избытком ДИФФ (15 мкл 0,1 М ДИФФ в сухом изопропаноле на 1 мг фермента) в 0,1 М буфере (бикарбонат аммония или ацетат N-этилморфолина, pH 8,5) в течение 1 ч при комнатной температуре. Реагент и свободные аминокислоты быстро отделяют диализом или гель-фильтрацией на сефадексе G-25. [c.509]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология