Устойчивые клоны

Мутация. Случайные, или спонтанные, мутации достаточно редки, однако популяции микроорганизмов любого вида настолько многочисленны, что вероятность появления хотя бы нескольких резистентных клеток вполне реальна. Применение антибиотика даст им селективное преимущество над чувствительными сородичами, которое приведет к естественному отбору устойчивых клонов и превращению их в доминирующую форму. [c.227]

Селекция котрансформантов с онкогенными последовательностями и геном устойчивости к микофеноловой кислоте. После обработки клеток плазмидной ДНК в составе кальцийфосфатного преципитата клетки культивируют в течение 3 сут на среде Дальбекко с 5 % эмбриональной сыворотки коров. После инкубации клетки снимают смесью трипсина с версеном (I 1) и рассевают по 10 клеток на 60 мм чашки на селективную среду, содержащую 25 мкг/мл микофеноловой кислоты, 2 мкг/мл аминоптерина, 250 мкг/мл ксантина, 15 мкг/мл гипоксантина и 10 мкг/мл тимидина (подробно о приготовлении среды ГАТ и микофеноловой кислоты см. ст. О. Л. Глебова, наст. сб.). Селективная среда также готовится на среде Дальбекко с 10,-% эмбриональной сыворотки коров. Кормление клеток свежей средой с селективными агентами проводится каждые 4 сут. Устойчивые клоны можно видеть через 7—10 сут, а выделение их с помощью титановых цилиндров проводится через 14 сут на селективную среду. Клоны размножают, выделяют ДНК и гибридизацией [c.228]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология