Блок-вставки приготовление

Приготовление блок-вставок (30 вставок 1,5 мкг ДНК на вставку) [c.65]

Для ферментативной обработки ДНК, содержащейся в блок-вставке, необходимо предварительно инактивировать протеин-киназу К, оставшуюся после приготовления образца, и убрать диализом ЭДТА и детергенты (табл. 7). Протеиназа К весьма устойчивый фермент и может оставаться активной в растворе ESP при 4°С по крайней мере 1 год. Однако она полностью инактивируется при обработке фенилметилсульфонилфторидом (ФМСФ), который крайне нестабилен и свежий раствор которого поэтому надо добавлять ежедневно. Любая остающаяся во вставке протеиназа К разрушит вносимые ферменты. Необходима чрезвычайная аккуратность, чтобы не загрязнять лабораторный стол и используемое оборудование протеиназой К. В правильно выбранной агарозе эффективными будут если не все, то большинство рестриктаз. Когда рестриктазы не активны в ага- [c.70]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология