Ферментативная обработка

Сначала разрушают стенки дрожжевых клеток путем механической, щелочной, кислотной или ферментативной обработки с последующей экстракцией гомогенной дрожжевой массы подходящим органическим растворителем. После такой очистки от органических и минеральных примесей дрожжевой продукт обрабатывают щелочным раствором для растворения белков. Далее белковый раствор, отделенный центрифугированием от оставшейся массы дрожжей, подвергают диализу. Очищенные от низкомолекулярных примесей белки осаждают, высушивают и используют в качестве белковых добавок в различные пищевые продукты сосиски, паштеты, мясные и кондитерские начинки. Белки дрожжей применяют также при получении искусственного мяса. Для этого их нагревают с последующим быстрым охлаждением или продавливанием белковой пасты через отверстия малого диаметра. В белковую пасту добавляют полисахариды и другие компоненты. [c.13]

На рис. 2.8 представлена машинно-аппаратурная схема линии производства спирта из крахмалосодержащего сырья с использованием механико-ферментативной обработки. [c.81]

Из смесителя 5 зерновой замес насосом 7 подается на контактную головку 6, где подогревается из распределителя 70 паром до 70...72 °С, и далее в аппараты 5 и 75 гидродинамической и ферментативной обработки I ступени, объем которых обеспечивает вьщержку в нем замеса не менее 3,5...4,0 ч. После заполнения аппарата примерно на 1/3 подключается циркуляционный контур, включающий центробежные насосы 7 и 75, обеспечивающие перемешивание массы в аппарате при ее температуре 65...70 °С. Во время гидродинамической обработки сьфья происходит дальнейшее разжижение, растворение крахмала и сухих веществ зерна за счет действия а-амилазы. [c.81]

ДНК с помощью обратной транскриптазы эта цепь в свою очередь используется в качестве матрицы для синтеза второй цепи. После ферментативной обработки эту двухцепочечную комплементарную ДНК встраивают в вектор. [c.78]

Для выделения используют небольшие объемы ночных культур. Методика включает ферментативную обработку агробактерий с последующим удалением белков из экстракта смесью фенол/хлороформ и концентрирование нуклеиновых кислот путем осаждения этанолом. Описанная ниже методика успешно использовалась для ряда штаммов агробактерий. В следующем разделе 1.12 представлены результаты расщепления суммарной ДНК, агробактерий ферментами рестрикции и примеры анализа по Саузерну последовательностей плазмид, содержащихся в различных мини-препаратах тотальной нуклеиновой кислоты агробактерий. [c.76]

Для дрожжей навеска составляет 2,5 г, и после ферментативной обработки фильтрата непосредственно используют для окисления без адсорбции. Жидкие объекты, например молоко, берут в количестве 75 мл, подкисляют крепкой серной кислотой до 0,1 и. концентрации кислоты в растворе. Дальше проводят анализ, как описано. Для высушенных объектов берут навеску 1—3 г. [c.100]

Ферментативная обработка может быть также проведена при 50 в течение 3 часов. [c.101]

Как известно, сахар производится в мире многими миллионами тонн, прежде всего путем переработки сахарного тростника и сахарной свеклы. В настоящее время биотехнологические методы позволяют получать сахар (сахарозу, глюкозу, фруктозу) на основе ферментативной обработки крахмала и даже целлюлозы. Тем не менее постоянно ведется поиск сладких вещеста и среди соединений других типов — более дешевых и менее коварных в связи с проб- [c.292]

При переработке в пищевой белок биомассу дрожжей тщательно очищают. С этой целью клеточные оболочки дрожжевых клеток разрушают с помощью механической, щелочной, кислотной или ферментативной обработки и затем экстрагируют гомогенную дрожжевую массу органическим растворителем. После очистки от органических и минеральных примесей полученный дрожжевой продукт обрабатывают щелочным раствором для растворения белков, затем белковый раствор отделяют от оставшейся массы дрожжей и направляют на диализ. В процессе диализа из [c.265]

Метод культуры ткани наиболее перспективен в изучении необходимой продолжительности воздействия лекарства и восстановления клеток и в разработке методов количественной оценки действия лекарств. Монослойная культура требует наименьшего количества клеток и незаменима, следовательно, при создании микрометодов, обеспечивающих множественный скрининг лекарств в широком диапазоне концентраций. Кроме того, использование этого метода облегчает автоматизацию испытаний. Если количество клеток на самом деле слишком мало, то часто бывает возможным культивировать клетки до тех пор, пока не получится достаточное для анализа количество, несмотря на то, что данные об изменении чувствительности клеток к препаратам в ходе культивирования оказываются противоречивыми. Как правило, два — три пассажа клеток не влияют па чувствительность, и такое пассирование даже рекомендуется, поскольку приводит к снижению вариабельности результатов между параллельными культурами [18]. Если примесь клеток стромы очень высока, то пассирование клеток часто представляет возможность очистить опухолевые клетки путем дифференциальной ферментативной обработки или физического отбора клеток (см. гл. 5 и 6). [c.262]

Из других биополимеров наибольшую известность имеет дек-стран. Декстраны представляют собой водорастворимые полисахариды, синтезированные из сахарозы с помощью некоторых микроорганизмов или бесклеточных энзимов, выделенных из культур этих микроорганизмов. Декстраны имеют разветвленную пространственную структуру. Степень полимеризации их колеблется в широких пределах в зависимости от условий синтеза. Получение декстрана сводится к ферментативной обработке раствора полисахаридов, с последующим осаждением спиртом (метанолом или этанолом). Декстран производится в ряде стран и используется для различных целей. Для стабилизации промывочных жидкостей на водной основе он производится в ФРГ, США, на Кубе. [c.155]

Получение декстрана сводится к ферментативной обработке раствора сахарозы в течение 24—48 ч, после чего образовавшийся декстран высаживается метанолом, высушивается и измельчается. В США предложено модифицирование декстрана обработкой формальдегидом (Л. Бейли и др.). Полученная смола вискоба более гидрофильна, лучше набухает и ферментативно устойчива [155]. [c.185]

Ферментативно-тепловая обработка сырья осуществляется следующим образом. Замес или картофельная кашка из аппаратов I ступени 8 и 13 с помощью дозировочных устройств 9 VI12 отводится в горизонтальный, разделенный на три отсека аппарат II гидродинамической и ферментативной обработки II ступени, снабженный мешалками 16. [c.82]

Грон и Ширбаум [22а] также изучали сочетание эффекта сухого размола.на вибрационной мельнице и ферментативной обработки лигнин-углеводного комплекса. Анализы древесины ели и тополя и сульфитной еловой целлюлозы до и после измельчения показали, что принципиальный эффект размола заключается в сокращении длины цепей углеводов. При этом падает содержание целлюлозы и одновременно соответственно возрастает содержание полиоз пониженного молекулярного веса. [c.736]

Примечание. Измерение флуоресценции вытяжки, подвергнутой только кислотному гидролизу без ферментативной обработки, дает сумму свободной и мононуклеотидной формы рибофлавина. [c.142]

Разность в результатах измерения флуоресценции рибофлавина до и после ферментативной обработки во втором определении составляет содержание кислотноот-щепляемого флавинаденин-динуклеотида. [c.142]

Однако при ферментативных воздействиях всегда приходится учитывать, что препарат фермента может обладать неизвестной активностью, способной изменить выделяемый полисахарид. Удаление белка после ферментативной обработки достигается обычно одним из методов денатурирования. К ним относятся нагревание, действие щелочи , хлороформа с амиловым спиртом (особенно распространеньый метод ), трифтортрихлорэтана , трихлоруксусной кислоты фссфоЕольфрамовой кислоты и т. д. Кроме того, используется избирательная сорбция белков на геле фосфата кальция , бентоните или каолине . Зти же методы, конечно, могут применяться и для удаления неферменткых белков, загрязняющих растворы полисахаридов. [c.486]

Для исследования ЛУК В. Н. Сергеева и соавт. использовали культуральные фильтраты дереворазрушающих грибов белой гнили [1, 17]. Ферментативному гидролизу подвергалась выделенная гель-хроматографией высокомолекулярная фракция ЛУК. После ферментативной обработки выделяется лигнин, свободный от углеводов. При гидролизе глюкованилина и кониферина показано, что моделируемая в этих соединениях р-фенилглюкозидная связь расщепляется при обработке ферментами культурального фильтрата грибов. Проведенные исследования [1, 17] свидетельствуют [c.176]

Применяя ту же методику, авторы работы [690] проводили ферментативную обработку беленой целлюлозы из древесины березы и ели, после чего подвергали ее размолу и оценивали бумагообразующие свойства целлюлозы. Авторы пришли к выводу, что ослабление внутренней когезии клеточной стенки волокна в результате ферментативного гидролиза ксилана снижает его устойчивость к набуханию, что, в свою очередь, ведет к сниженик> расхода энергии ири размоле целлюлозы ц улучшению бумагообразующей способности волокон благодаря повышению их гибкости. Однако, прочность целлюлозы иосле ферментации оказалась более низкой, чем у обычной целлюлозы, что, ио мнению авторов, указывает на важную роль ксилана в обеспеченпи механической прочности волокна. Авторы считают, что метод ферментации может найти практическое применение для снижения расхода энергии в производстве бумаги. Для обозначения указанного процесса они даже применяют термин энзиматический размол . [c.381]

Источником получения ДНК обычно является ви-лочковая железа (тимус) телят, т. к. в ее клетках ядра составляют больше половины объема. Для получения РНК удобнее всего использовать дрожжи. Н. к. всегда тесно связаны с белками в нуклеопротеидных структурах. Для их освобождения проводят денатурацию белков добавлением к взвеси клеток (предварительно вскрытых путем разрушения их оболочки ) р-ра фенола высокой концентрации, а также нек-рых детергентов (напр., додецилсульфата) или хлороформа. Обычно фенольная депротеинизация ведется так, что фенола дается большой избыток и после отстаивания или центрифугирования образуются два слоя внизу — фенол, насыщенный водой, сверху — вода, насыщенная фенолом. Денатурированные белки сосредоточиваются в нижнем слое и у границы раздела, Н. к.— в верхнем водном слое, откуда их осаждают спиртом. При фенольной экстракции возможно частичное фракционирование Н. к. на ДНК (растворяется преимущественно при pH9) и РНК (растворима и при рН5). Однако полностью отделить ДНК и РНК друг от друга удается только дополнительным воздействием специфическими гидролитич. ферментами ДНК-азой и РНК-азой. Эти ферменты добьхваются из поджелудочной железы рогатого скота, подвергаются тщательной очистке и кристаллизации. Действуя ДНК-азой, разрушают ДНК и получают чистую РНК. С помощью РНК-азы очищают ДНК от РНК. После ферментативной обработки полученные продукты снова подвергают фенольной депротеинизации с последующим осаждением Н. к. спиртом. [c.189]

Разделение синтетических аминокислот. — Гринштейн разработала удобный метод ферментативного разделения рацематов аминокислот. Например, -аланин ацетилируют и образующееся ацетильное производное 1) -аланина обрабатывают раствором фермента, катализирующего деацетилирование. Раствор этого фермента может быть легко приготовлен из свиных почек, кусочки которых гомогенизируют с водой в гомогенизаторе Уоринга и полученный гомогени-зат центрифугируют. Прозрачный раствор, содержащий фермент, декантируют в целлофановый мешок, который опускают в проточную воду на ночь для удаления диализом растворимых небелковых компонентов. Диализованный раствор фермента вновь центрифугируют, после чего он готов для использования. Полное расщепление ацетил-Ь-аланина проходит примерно за четыре часа. Фермент действует главным образом на ацетильное производство природной аминокислоты. В результате указанной ферментативной обработки образуется смесь [c.644]

Соединения с высокой противовоспалительной активностью были получены з биохимическим гидроксилированием фторокси-прегненов. Так, 12а-фтор-Пр,17а,21-триоксипрегнен-4-дион-3,20 при ферментативной обработке A tinomy es (АТСС 11.009) был [c.392]

Млечный сок, наз. латексом (см. Латекс натуральный), добывается подсочкой деревьев, достигших пятилетнего возраста. Каучук в латексе находится в виде взвешенных в воде шарообразных или грушевидных частиц — глобул. Для получения НК млечный сок на место добычи подвергают желатинированию (или коагуляции), добавляя муравьиную или уксусную к-ту. Образующийся рыхлый сгусток (гель) промывают водой и прокатывают на вальцах в листы, к-рые сушат и обычно коптят в камерах, наполняемых дымом. Копчение придает НК устойчивость против окисления и предотвращает развитие в них бактерий. Готовые листы НК болое или менее прозрачны и имеют янтарный цвет такой НК наз. смокед шит. Мепее распространен т. наз. светлый креп. При его получении к млечному соку перед коагулированием для отбелки прибавляют бисульфит натрия промытые и отвальцованные листы сушат на открытом воздухо или в камерах. Листы этого сорта НК ие прозрачны и имеют кремовый оттенок. Состав обоих видов товарного НК почти одинаков, опи содержат (в %) 93—94 собственно НК 2,4—2,9 белков 0,3 сахаров 2,5—3 смол 0,3 золы. Помимо этих основных видов, применяются другие, менее ценные сорта НК, напр, пара-каучук, добываемый кустарным способом из дикорастущей гевеи. Выпускаются также каучуки специального назначения, нанр. освобожденный от белков путем ферментативной обработки. [c.246]

Первый нуклеотид, инозиновая кислота (по-гречески — мышечная ткань), был выделен Либихом [2] в 1847 г. из мясного экстракта отчасти как результат полелп1ки, поднятой Берцелиусом по поводу наличия креатина в сыром и вареном мясе). С тех пор было выделено большое число мононуклеотидов, как правило, 5 -фосфаты, хотя в яде тигровых змей и родственных видов был найден также аденозин-З -фосфат 13]. Эти соединения выделяют прямой экстракцией тканей или организмов 14—9], в которых они обычно присутствуют в небольших количествах в качестве промежуточных соеди-нени1 обмена. Однако основным источником мононуклеотидов являются их полимерные производные, нуклеиновые кислоты. При щелочном гидролизе в мягких условиях [10, 11] рибонуклеиновой кислоты образуется смесь 2 - и З -фосфатов нуклеозидов, которую можно легко разделить с помощью ионообменной хроматографии 112], Для выделения аналогичных 5 -эфиров требуется применение ферментативного гидролиза, как правило, с использованием фосфо-диэстеразы змеиного яда 113, 14]. Подобная ферментативная обработка дезоксирибонуклеиновой кислоты после предварительной обработки дезоксирибонуклеазой приводит к дезоксинуклеозид-5 -фосфатаы [15—17]. Очищенная диэстераза змеиного яда значи- [c.123]

Основное влияние на смачиваемость хлопкового волокна оказывают, по данным Викторова, пектиновые вещества. Викторов и Иванова удаляли пектиновые вещества из хлопка в таких условиях, при которых не происходит разрушение или удаление других компонентов хлопкового волокна. Для этой цели применялась ферментативная обработка волокна культурами бактерий МасегаШз и Ре1зтеиз. Хлопковое волокно после ферментативной обработки поглощало такое же количество красителей, как волокно, отваренное со щелочью. Этот факт представляет большой интерес. Пектиновые вещества являются еще более гидрофильными, чем целлюлоза, и поэтому их удаление [c.128]

Для этого можно использовать так называемые первичные культуры, т. е. культуры, приготовленные непосредственно из клеток данного животного. Определенные органы жнвотного-донора удаляют в асептических условиях, грубо измельчают и полученный гомогенат растворяют путем ферментативной обработки, получая суспензию отдельных клеток. Суспензию инкубируют в соответствующей среде до накопления достаточной биомассы. В определенных условиях альтернативой первичной культуре может служить вторичная культура, т. е. культура клеток, прошедщая многие пересевы. [c.152]

В настоящее время ферментативные процессы широко используются в различных отраслях промышленности. В хлебопекарном производстве для ускорения гидролиза крахмала и улучшения качества теста используют амилазы. При приготовлении детской пищи с целью облегчения переваривания углеводов и белков исходные продукты обрабатывают амилазой и протеиназами. Протеиназы и пектиновые ферменты используются в виноделии и при приготовлении соков. Они способствуют ускорению сокоотделения и осветлению сока. В сыроварении используют ренин или химозин, образующийся в сычуге — четвертом отделе желудка телят и ягнят молочного возраста. Амилазы используются в текстильном производстве для расшлихтовки хлопчатобумажного волокна (удаление примесей крахмала) перед отбеливанием и крашением. Для придания любимым всеми джинсам благородного потертого вида деним (джинсовую ткань) подвергают биохимической обработке амилазой и целлюлазой. Механизм ферментативной обработки денима аналогичен тому, который имеет место при ферментативном гидролизе крахмала, ведь целлюлоза (основная составляющая хлопкового волокна), как и крахмал, относится к классу полисахаридов. Причем ферменты начинают действовать с поверхностных волокон, которые окрашены индиго, в результате связь этих волокон с поверхностью ткани ослабевает, и постепенно на ткани образуются белые участки. Специфические протеиназы применяются в кожевенной промышленности с целью мягкого удаления волос с кожи, в технике — при регенерации кинопленки. Щелочные протеазы наряду с липазами используют при производстве синтетических моющих средств. [c.122]

Выделение гликопротеинов соединительной ткани связано со многими проблемами. Во-первых, гликопротеипы трудно отделить от кислых гликозаминогликанов. Во-вторых, некоторые гликопротеины прочно связаны со структурными белками волокон (коллагеном, эластином, ретикулином) и могут быть выделены только в результате ферментативной обработки. [c.266]

Защита от воздействия РНКазы, по всей вероятности, наиболее чувствительный и простой метод выявления и анализа специфических РНК [13]. Этот метод позволяет обнаружить даже столь малое количество РНК, как 0,1 пг [13]. Его преимущества по сравнению с использованием нуклеазы 81 [10] сводятся к простоте получения зонда, высокой чувствительности анализа и большей эффективности ферментативной обработки на конечных стадиях (обработка РНКазой вместо нуклеазы 51). По-видимому, на этой стадии гибрид менее чувствителен к избыточной обработке РНКазой, чем к обработке нуклеа-зой 51. [c.30]

В нормальных условиях слипание и слияние клеток происходит сравнительно редко (в зависимости от функционального состояния клеток). В связи с практическими проблемами соматической гибридизации клеток, реконструкции клеток (слияние кариопласта с цитопластом), получения гибридом из лимфоцитов и клеток миеломы для выработки моноклональных антител необходимо создание универсальных методов слияния клеток и органелл in vitro. Используемые индукторы слияния на фоне Са + (1—10 мМ) клеток животных — вирус Сендай (в оболочке которого присутствует нейраминидаза), клеток растительных протопластов — полиэтиленгликоль — приводят к низкому выходу гибридных клеток. В 1979 г. был разработан универсальный метод слияния любых клеток (в суспензии) —метод электрического пробоя. Этот метод основан на резко.м увеличении проводимости и проницаемости мембран в сильном электрическом поле (40 мкс, 4—6 кВ/см). При этом среди способов приведения клеток в контакт перед электростимуляцией используют диэлектрофорез — перемещение клеток в неоднородном переменном электрическом поле в растворе диэлектрика в сторону увеличения напряженности (в этом случае формируется большое число контактирующих друг с другом параллельных цепочек клеток). Увеличение образования гибридных клеток (химер) или гигантских клеток описанным способом достигается ферментативной обработкой клеток до слипания и слияния, главным образом направленной на удаление гликокаликса. [c.90]

Для ферментативной обработки ДНК, содержащейся в блок-вставке, необходимо предварительно инактивировать протеин-киназу К, оставшуюся после приготовления образца, и убрать диализом ЭДТА и детергенты (табл. 7). Протеиназа К весьма устойчивый фермент и может оставаться активной в растворе ESP при 4°С по крайней мере 1 год. Однако она полностью инактивируется при обработке фенилметилсульфонилфторидом (ФМСФ), который крайне нестабилен и свежий раствор которого поэтому надо добавлять ежедневно. Любая остающаяся во вставке протеиназа К разрушит вносимые ферменты. Необходима чрезвычайная аккуратность, чтобы не загрязнять лабораторный стол и используемое оборудование протеиназой К. В правильно выбранной агарозе эффективными будут если не все, то большинство рестриктаз. Когда рестриктазы не активны в ага- [c.70]

Другим подходом. к получению суспензии клеток из солидной ткани является обработка ткани хелатирующими агентами, обычно в сочетании с ферментами. При использовании только хелатирующих препаратов выход интактных клеток в суспензию оказывается ниже, чем после ферментативной обработки. К наиболее часто используемым хелатирующим агентам относятся ЭДТА, этиленгликоль (2-аминоэтиловый эфир)-п, п1-тетраацетат (ЭГТА) и цитрат. [c.199]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология