ДЭАЭ-декстран трансфекция

Метод трансфекции клеток, основанный на использовании ДЭАЭ-декстрана, является альтернативой рассмотренному выше кальций-фосфатному методу [220]. Этот подход широко используется для получения клеточных линий, временно экспрессирующих рекомбинантные гены. ДЭАЭ-декстран смешивают с ДНК в питательной среде с низким содержанием сыворотки, и смесь на некоторое время добавляют к культивируемым клеткам. Комплексы ДНК с ДЭАЭ-декстраном сорбируются на поверхности клеток и поступают внутрь с помощью эндоцитоза. Доставку [c.152]

ДЭАЭ-декстрановый метод по сравнению с гипертоническим солевым методом обеспечивает значительное увеличение инфекционности ДНК различных вирусов. Он прост и дает высоковоспроизводимые результаты. К недостаткам метода можно отнести то, что для некоторых культур клеток ДЭЛЭ-декстран может быть токсичен при использовании его в высокой концентрации. Кроме того, эффективность трансфекции может существенно зависеть от качества препарата ДЭАЭ-декстрана. [c.333]

Кальций-фосфатный метод. Аномально низкая инфекционность молекул ДНК аденовирусов и безуспешные попытки повысить ее, изменяя буферные растворы, концентрации ДЭАЭ-декстрана и ДНК, заставили Ф. Грэхема и А. ван дер Эба (1973 г.) искать модификации данного метода трансфекции. В 1970 г М. Мандель и А. Хига показали, что для трансфекции бактериальных клеток Е. соИ необходимо обработать их раствором хлорида кальция (см. [c.333]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология