Гели, используемые в методе ГПХ декстрановые

Электрофорез использовали в основном для подтверждения однородности фракций выделенных полисахаридов, а также в экспериментах по фракционированию в щелочном растворе полиоз из еловой холоцеллюлозы [67]. Этот метод, а также гель-проникающая хроматография на полиакриламиде не обеспечили успеха при фракционировании. Гель-проникающая хроматография на декстрановых гелях дала хорошие результаты при разделении смесей полиоз, [c.35]

Методы, связанные с применением ионообменных смол, целлюлоз или гелей, основаны на одном и том же принципе. При других методах фракционирования на колонках, когда используются более или менее инертные гели, состоящие из шариков различной пористости, разделение происходит главным образом благодаря различию в размерах разделяемых частиц. Так, применение агара или, еще лучше, агарозы вместо декстрановых гелей дало возможность распространить принцип, лежащий в основе фракционирования с помощью сефадекса, на частицы, размеры которых соответствуют размерам вирусов [3, 470]. Но каковы бы ни были эти различия, во всех методах, связанных с применением гелей, более или менее важную роль в процессе разделения играет ионный обмен. [c.44]

Избирательность различных материалов, используемых для гель-фильтрации, позволила использовать их в других методах разделения. Так, гели сефадексов применяются в адсорбционных методах, тонкослойной и распределительной хроматографии, а также в качестве носителя при зонном электрофорезе. Сефадексы с ионообменными свойствами (диэтил-, аминоэтил-, карбоксиметил-, сульфоэтнлпроизводные декстранового полимера) обладают одновременно преимуществами ионообменных смол и материалов на основе целлюлозы. [c.478]

Разновидность хроматографического метода, в котором роль неподвижной фазы играет макропористый сорбент, адсорбционно инертный по отношению к молекулам хроматографируемого веш,е-ства, называется гель-проникаюш ей хроматографией, если размеры пор соизмеримы с размерами молекул. Название метода сложилось исторически и недостаточно полно отражает его сущность. Это объясняется тем, что на первых порах (60-е годы) в качестве сорбента использовали только набухающие гели — декстрановые для разделения белков и нолистирольные для анализа полимеров [1, 2]. Они представляют собой трехмерные полимерные сетчатые структуры (рис. HI.1), внутрь которых могут с определенной вероятностью проникать различные макромолекулы. Эта вероятность зависит от соотношения размеров макромолекул и ячеек сетки, а скорость проникновения в гель определяется диффузионной подвижностью макромолекул. Для малых макромолекул она выше, чем для больших. Очень большие молекулы не проникают внутрь геля, а очень малые попадают туда с вероятностью, близкой к единице. [c.81]

Хроматографические материалы для гель-хроматографии, их назначение и структура подробно описаны в гл. 6. При соответствующей степени грануляции и применении надлежащей методики их также можно использовать для приготовления тонких слоев. Полная информация о декстрановых гелях марки сефадекс суперфайн , поставляемых фирмой Pharma ia, содержится в выпущенной этой фирмой рекламной брошюре [2]. Выбранный гель оставляют набухать в жидкой среде в течение рекомендованного промежутка времени, после чего суспензию геля наносят в виде слоев толщиной 0,5 мм с помощью соответствующего приспособления. Чтобы в системе установилось равновесие, пластинки с нанесенным слоем помещают в специальную камеру (рис. 9.6). В разд. 9.2.2 кратко изложен метод приведения системы в равновесие. В работе [66] описано разделение пуриновых и пиримидиновых оснований и нуклеотидов по упрощенной методике на смеси 16 г сефадекса G-10 с 4 г силикагеля GF254 или 4 г целлюлозы. Приготовленный слой сохраняет разделяющие свойства сефадекса, но прочность его повышается, становится примерно такой же, как у слоев силикагеля или целлюлозы. [c.109]

При более тщательном исследовании Флодин [19] установил следующие моменты. Действие колонки можно повысить наиболее эффективно путем уменьшения размера частиц декстранового геля. Вязкость исследуемого образца ставит некоторый предел применимости метода фильтрования через гели, однако эффекты разделения не зависят от концентрации растворенных веществ. Из раствора белка можно полностью удалить соли, используя для элюирования воду, но так как в этих условиях некоторые белки склонны выпадать в осадок, элюирование, видимо, лучше проводить при помощи летучего буферного раствора. Декстраны, помимо эффекта молекулярного сита, слабо адсорбируют ароматические и гетероциклические соединения кроме того, в зависимости от ионной силы и pH геля [20] может наблюдаться сильная адсорбция некоторых основных веществ. [c.219]

С увеличением степени разбавления уменьшается вероятность интермолекулярных соединений и возрастает число петель в макромолекулах декстрана или количество молекул мостикообразователя, присоединенного только одной функциональной группой. Декстрановые гели проницаемы для очень крупных органических молекул, и степень их проницаемости можно изменять в широких пределах. Это позволяет широко использовать ситовой метод хроматографирования сложных смесей органических веш еств различного молекулярного веса. Даже при сильном набухании гранулы сефадекса сохраняют форму и прочность, что облегчает протекание жидкости по высоким колонкам, заполненным набухшим гелем. Набухший гель может иметь и форму пленки любой толщины, легко смачивающуюся водными растворами. [c.120]