Фракционирование компонентов бактериальной

Описанные выше методики обычно применяют для фракционирования бактериальных клеток, меченных одним из компонентов среды, который неспецифически включается во все молекулы клеток. При инкубировании бактериальных клеток в присутствии специфического предшественника макромолекулярного вещества для измерения скорости его синтеза важно определить, что данное вещество содержит всю радиоактивность. Это делают путем фракционирования клеток и подсчета радиоактивности каждой фракции по описанным выше методикам. Если в изучаемой фракции содержится вся радиоактивность, то дальнейшие эксперименты можно упростить. Например, если для определения количества синтезируемой ДНК применяется радиоактивный тимидин и в предварительных опытах показано, что он не включается в другие фракции, то клетки в культуральной среде обрабатывают следующим образом. Среду охлаждают и добавляют к ней охлажденную 10%-ную< ТХУ. Осадок, содержащий ДНК, собирают на фильтре,, промывают охлажденным этанолом, высушивают и подсчитывают в нем радиоактивность. Эта методика применима для определения количества синтезируемой ДНК, а также белка или РНК, если предшественник последних обнаруживается только в одной фракции. [c.291]

Существует много с1пособов получения и экстрагирования бактериальных антигенов [32]. От выбора способа так же, как от условий и фазы роста бактериальной культуры, зависит природа иммуногена. Обработанные ультразвуком экстракты бактериальных стенок представляют собой чрезвычайно сложны е смеси (см., например, рис. 2.4), и существует много способов физического и химического фракционирования, для того чтобы сделать исходный материал более однородным. Хорошим примерам служит изучение антигенов микобактерий [33]. Полиспецифические антисыворотки особенно полезны при определении молекулярных компонентов основных фракций полисахаридов и белков по классификации Seibert [34]. [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология