Конъюгат инсулин пероксидаза

На рис. 19 приведены кривые связывания иммобилизованных на полистироле антител к инсулину с конъюгатом инсулин — пероксидаза. Исследуемые сыворотки различаются по значени 1м эффективных констант равновесия. Для количественного определения инсулина могут быть использованы антисыворотка и конъюгат, эффективная константа связывания которых /- 10 М". Для других тест-систем допустимое значение Кэф будет определяться требованиями, предъявляемыми к чувствительности и точности разрабатываемого метода. [c.160]

Рассматриваемый ниже ИФА инсулина проводится методом последовательного насыщения (см. гл. 4, 2), включающим связывание иммобилизованными антителами сначала определяемого инсулина, а затем конъюгата инсулина с пероксидазой и измерение ферментативной активности на носителе, величина которой пропорциональна начальной концентрации гормона. [c.279]

Рис. 19. Связывание конъюгата инсулин — пероксидаза (Инс — ПХ) с ад- , сорбированными на полистирольном ен фермент, ТО важным эта-планшете антителами против инсулина, выделенными из разных сывороток по оси ординат — оптическая плотность А при 490 нм продукта пероксндазной реакции окисления о-феннленднамнна перекисью водорода.

Антитела к инсулину стандартные растворы с известной концентрацией инсулина конъюгат инсулина с пероксидазой (Инс-ПХ) реагенты для фотометрического или хемилюминесцентного определения активности ПХ на основе о-феннленднамина нли люминола (см. 1 этой главы) полистирольные планшеты (оптически прозрачные нли непрозрачные в зависимости от способа детекции ПХ) автоматические пипетки спектрофотометр или люминометр. [c.279]

После иммобилизации антител (антигена) часть центров сорбции носителя экранируется связанным белком и становится недоступным для взаимодействия с компонентами анализируемой пробы и ферментным конъюгатом. В связи с этим наиболее ценную для анализа информацию дает сравнение эффективности сорбции меченного пероксидазой инсулина на двух иммуносорбентах, один из которых содержит иммобилизованные специфические антитела, а другой — антитела неиммунизированного животного (рис. 26). Подобный эксперимент позволяет учесть суммарное неспецифическое связывание с носителем и иммобилизованными иммуноглобулинами, но не дает возможность различить эти два эффекта. [c.215]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология