Полиэтиленгликоль использование для трансформации

Доступность относительно больших количеств векторной ДНК с эффективно экспрессирующимися селективными/скрини-руемыми генами возродила интерес к трансформации посредством ДНК, и многие исследователи быстро оптимизировали целый набор методик для достижения эффективной доставки векторной ДНК в растительные протопласты, подразумевающие использование липосом, полиэтиленгликоля и электропорацию [c.198]

Введение рекомбинантных ДНК в составе векторных молекул в хлоропласты высших растений в основном осуществляют биолистическими (biolisti ) методами путем бомбардировки клеток микрочастицами с сорбированными на них молекулами ДНК [199]. Принцип таких методов будет кратко рассмотрен в разделе 3.8.3. По-прежнему весьма популярным остается метод трансформации хлоропластов с использованием полиэтиленгликоля [200]. [c.142]

Возможна также трансформация целых клеток, обработанных 0,1 М ацетатом лития, в присутствии полиэтиленгликоля. Этот п 1етод значительно проще, но эффективность трансформации на порядок ниже, чем при использовании протопластов. Широко используют и метод электропорации дрожжевых клеток. [c.363]

Трансформация протопластов изолированной ДНК. Впервые достоверная возможность химической трансформации растений бьша показана в опытах с двудольными. Их протопласты обрабатывали в присутствии полиэтиленгликоля вьщеленными Ti-плазмидами. После регенерации стенки клетки Tajin опухолевыми, а ДНК обнаружилась в ядрах, причем Т-ДНК оставалась в составе Ti-плазмид (Krens et ai, 1982). Этот результат позволил приступить к созданию векторов, предназначенных для переноса генов в растения без использования агробактерий. [c.382]

До 1983 г. все генно-инженерные эксперименты проводились на протопластах S. erevisiae. Однаш X. Ито с соавторами обнаружили, что плазмидн)оо трансформацию клеток дрожжей можно осуществить и без удаления клеточной стенки. Для этого клетки обрабатывают полиэтиленгликолем в присутствии катионов щелочных металлов (Li+, s+, Rb+, К+, Na+). Особенно хорошие результаты дает использование солей лития. Интересно отметить, что компетентность клеток дрожжей индуцирует в основном ПЭГ, а перечисленные катионы лишь повышают эффективность плазмидной трансформации. [c.293]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология